細胞空泡原因及解決方法有哪些

培養細胞過程中，可能會遇到細胞空泡化現象，具體表現為：變性細胞的胞質、胞核內出現大小不一的空泡(水泡)，細胞呈蜂窩狀或網狀的現象。變性嚴重者，小水泡相互融合成大水泡，細胞核懸于中央，或被擠于一側，細胞形體顯著腫大，胞質空白，外形如氣球狀。

那么細胞空泡原因及解決方法有哪些?

1.細胞老化

這是因為原代培養時細胞處于終末分化狀態，不會再分裂，如果培養時間過長細胞就會空泡化從而導致死亡。但傳代細胞出現這種狀況比較少見，如果出現，原因一般都是因為細胞傳代次數過多，嚴重老化。

解決方法

原代細胞使用較低代次進行實驗，傳代細胞避免傳代次數過高。

2.培養液錯誤配制

培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當、血清質量不合格等原因，引起培養液的滲透壓與PH值發生改變。

解決方法

更換新鮮培養液調整到合適的PH值，再進行培養。

注意培養液的正確配制與存儲方法。

使用質量好和渠道正規的胎牛血清，因為這樣的血清營養豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現這類問題。

3.細胞消化時操作不當

胰酶消化時間過長導致細胞狀態受損，以及吹打時力氣過大產生的大量氣泡長期存在于培養液中也會導致細胞的空泡化。

解決方法

選用合適的胰酶濃度和適當的消化時間進行消化。

在操作時避免吹打太過用力出現太多氣泡，如果出現了大量氣泡，可將氣泡去除后再培養。

4.及時更換培養基

細胞在培養時會進行代謝，如果不及時換液細胞會因為營養物質的不斷消耗、細胞代謝產物的積累從而使細胞缺乏營養，導致饑餓誘導形成自噬，從而產生空泡化，這種空泡在光學顯微鏡下是看不到的，只有在電鏡下才能觀察到。

解決方法

及時換液，通常2-3天需換液。

5.污染

化學物質：培養細胞時引入了一些各種自然或人工化合物等化學物質，如弱堿胺類物質導致的溶酶體的空泡化；MIPP， 一種查爾酮相關的分子，可以誘導大量的胞質空泡，導致細胞出現相關巨泡式死亡的特征。

細菌、病毒：細菌和病毒的產物或者細菌病毒感染細胞后導致細胞狀態變差也會引起細胞空泡化，而其機制也各不相同。

解決方法

在細胞培養時提高無菌操作意識，操作規范，使用無菌試劑、耗材。

可定時通過PCR或市面上專用的檢測試劑盒來鑒定是否發生了污染，一旦發現立即做出處理，避免污染其他細胞。

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