細(xì)胞培養(yǎng)過程中如何預(yù)防支原體污染？

支原體發(fā)現(xiàn)于1898年，1956年Robinson等從細(xì)胞培養(yǎng)物種分離出支原體，至今已經(jīng)確定了180多種支原體，但其中有6種占了95%的細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染事件。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界連續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)種支原體污染概率高達(dá)15~35%。     

支原體又稱霉形體，直徑在0.1-0.3μm，是目前發(fā)現(xiàn)的微小的、簡(jiǎn)單的原核生物，可以輕松地通過濾膜，混入培養(yǎng)系統(tǒng)中，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細(xì)胞膜表面，支原體沒有剛性的細(xì)胞壁，因此普通的抗生素對(duì)它根本不起作用，實(shí)驗(yàn)室常簡(jiǎn)的種類有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。
  支原體污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)造成多方面的不良影響，已經(jīng)成為在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的一個(gè)棘手問題，嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。因此，定期進(jìn)行支原體檢測(cè)和去除，確保無支原體存在細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)才能獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋中預(yù)防支原體污染的方法

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，培養(yǎng)箱水槽，水浴鍋經(jīng)常會(huì)有支原體以及各種細(xì)菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時(shí)，水槽中的水源即會(huì)成為細(xì)胞污染的重要來源。保持水槽的潔凈，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的順利進(jìn)行非常重要。
推薦：全球眾多實(shí)驗(yàn)室日常都在使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的Water Shield支原體污染防護(hù)劑（水槽用）。Water Shield可持續(xù)作用四周，使水源避免受到支原體、細(xì)菌、真菌、霉菌、孢子的污染。

特點(diǎn)

（1）長(zhǎng)效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑，不易揮發(fā)，可持續(xù)作用4周。

（2）安全。不含醛類或疊氮化物，對(duì)細(xì)胞無毒害。

（3）廣譜。預(yù)防支原體、細(xì)菌、真菌、霉菌、孢子污染。

（4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

（5）不產(chǎn)生水垢。

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