LAMP檢測(cè)技術(shù)與qPCR檢測(cè)技術(shù)的區(qū)別與不足

擴(kuò)增原理：

LAMP與qPCR相比有哪些不足？

由于LAMP方法與qPCR方法各自的特點(diǎn)，導(dǎo)致這兩種檢測(cè)手段分別有其不同的適用范圍。

1. 產(chǎn)物結(jié)構(gòu)復(fù)雜：LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物呈現(xiàn)出高度分支的簇環(huán)結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)可能對(duì)產(chǎn)物的純化和后續(xù)分析造成一些挑戰(zhàn)

2. 不適用于大片段擴(kuò)增：LAMP技術(shù)相對(duì)適用于短片段的核酸擴(kuò)增，不太適用于較長(zhǎng)片段的擴(kuò)增，這一點(diǎn)與傳統(tǒng)PCR方法不同。

3. 定量困難：LAMP技術(shù)的產(chǎn)物數(shù)量與起始模板數(shù)量之間的線性關(guān)系可能較差，因此在定量方面存在一定的局限性。

4. 部分產(chǎn)物難以區(qū)分：LAMP反應(yīng)產(chǎn)物包括多個(gè)簇環(huán)結(jié)構(gòu)，其中有些結(jié)構(gòu)可能與非特異性產(chǎn)物難以區(qū)分，可能對(duì)結(jié)果解釋帶來(lái)困擾。

LAMP：適用于快速、初步的檢測(cè)，如一些疾病的早期篩查，野外環(huán)境中的檢測(cè)等。

如：臨床中的一些疾病檢測(cè)試劑盒。

qPCR：在精確定量和定性檢測(cè)方面表現(xiàn)出色，廣泛用于病原體檢測(cè)、基因表達(dá)分析等。

如：支原體qPCR檢測(cè)試劑盒

德國(guó)MB支原體qPCR檢測(cè)試劑盒

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無(wú)交叉反應(yīng)）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品，便于方法學(xué)驗(yàn)證。

⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。

支原體qPCR檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)：

1.內(nèi)控對(duì)照為獨(dú)立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋所有常見(jiàn)易感染細(xì)胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細(xì)菌和真核DNA無(wú)交叉反應(yīng)。

3.高靈敏度，最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

4.相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

5.有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。