支原體污染細(xì)胞清除劑使用方法，用什么稀釋比較好

支原體清除劑主要用于細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)胞支原體清除。那如何使用支原體清除劑呢，支原體清除劑用什么稀釋比較好呢？今天締一生物小編以德國(guó)Minerva-Biolabs 細(xì)胞支原體清除劑Zell Shield使用為例，進(jìn)行說(shuō)明。

德國(guó)Minerva-Biolabs細(xì)胞支原體祛除劑 Zell Shield是一種復(fù)合抗生素類(lèi)產(chǎn)品，可直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成，有效抑制微生物的增殖，對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌、霉菌、酵母、原蟲(chóng)也同樣有效。

Zell Shield適合如下兩種情況：

1）培養(yǎng)的細(xì)胞面臨支原體的高污染風(fēng)險(xiǎn)，尤其是取自生物有機(jī)體的原代細(xì)胞。這時(shí)建議在培養(yǎng)基中加1%的Zell Shield。

2）發(fā)現(xiàn)細(xì)胞已被支原體污染，而不愿意丟棄（如已轉(zhuǎn)染，已經(jīng)體外刺激或已費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞），希望繼續(xù)培養(yǎng)，這時(shí)可采用下面的“懸浮沖洗法”進(jìn)行支原體的祛除。

對(duì)于非常珍貴的細(xì)胞或不易獲得的生物樣品（如細(xì)胞種子），發(fā)現(xiàn)有支原體污染，希望挽救。這時(shí)我們推薦使用MB公司的Mynox或Mynox Gold進(jìn)行支原體的祛除。

Zell Shield的用法如下：

1）常規(guī)使用

2）Zell Shield為-18℃避光保存。使用前，建議融化分裝。避免反復(fù)凍融。Zell Shield按1:100直接加入到新鮮配制的培養(yǎng)基。例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield，混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，最多7天需要更換新的含有Zell Shield的培養(yǎng)基，以獲得良好的保護(hù)。

說(shuō)明：Zell Shield在培養(yǎng)基過(guò)濾前或過(guò)濾后加均可。如果培養(yǎng)基尚未無(wú)菌過(guò)濾，可在加入Zellshield后再進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。

一般情況下，使用了Zell Shield，就不必再額外添加雙抗了。

2）懸浮沖洗法（適合已有支原體污染的細(xì)胞）

約98％的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。細(xì)胞傳代前，用干凈的PBS懸浮沖洗3次，就能把70%以上的支原體沖洗下來(lái)，再通過(guò)低速離心，棄上清，即可祛除大部分支原體（離心后細(xì)胞沉淀，沖洗下來(lái)的支原體在上清中）。再繼續(xù)用含1%Zell Shield的培養(yǎng)基持續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞再連續(xù)傳代3次，每次都用PBS對(duì)細(xì)胞進(jìn)行懸浮沖洗，并用含1%Zell Shield的培養(yǎng)基培養(yǎng)（見(jiàn)下圖），即可逐漸祛除細(xì)胞中的支原體。

另外，需要說(shuō)明的是ZellShield含有氟喹諾酮類(lèi)藥物，可與其他抗生素聯(lián)合使用，作為耐藥性標(biāo)記。其他抗生素成分不用作耐藥性標(biāo)記。

以上就是細(xì)胞支原體清除劑ZellShield的使用介紹，北京締一生物科技有限公司國(guó)內(nèi)總代Ausbian品牌,德國(guó)Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)使用的Ausbian澳洲進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,新生牛血清，干細(xì)胞培養(yǎng)基,馬血清，德國(guó)MB支原體檢測(cè)/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問(wèn)締一生物官網(wǎng)：www.276mk.com。聯(lián)系電話:4006661688。