支原體污染細胞清除劑使用方法，用什么稀釋比較好

支原體清除劑主要用于細胞培養中細胞支原體清除。那如何使用支原體清除劑呢，支原體清除劑用什么稀釋比較好呢？今天締一生物小編以德國Minerva-Biolabs 細胞支原體清除劑Zell Shield使用為例，進行說明。

德國Minerva-Biolabs細胞支原體祛除劑 Zell Shield是一種復合抗生素類產品，可直接加入到細胞培養基中，通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制微生物的增殖，對大多數革蘭氏陽性和陰性細菌、霉菌、酵母、原蟲也同樣有效。

Zell Shield適合如下兩種情況：

1）培養的細胞面臨支原體的高污染風險，尤其是取自生物有機體的原代細胞。這時建議在培養基中加1%的Zell Shield。

2）發現細胞已被支原體污染，而不愿意丟棄（如已轉染，已經體外刺激或已費力擴增的細胞），希望繼續培養，這時可采用下面的“懸浮沖洗法”進行支原體的祛除。

對于非常珍貴的細胞或不易獲得的生物樣品（如細胞種子），發現有支原體污染，希望挽救。這時我們推薦使用MB公司的Mynox或Mynox Gold進行支原體的祛除。

Zell Shield的用法如下：

1）常規使用

2）Zell Shield為-18℃避光保存。使用前，建議融化分裝。避免反復凍融。Zell Shield按1:100直接加入到新鮮配制的培養基。例如：500ml培養基中添加5ml Zell Shield，混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃進行培養時，最多7天需要更換新的含有Zell Shield的培養基，以獲得良好的保護。

說明：Zell Shield在培養基過濾前或過濾后加均可。如果培養基尚未無菌過濾，可在加入Zellshield后再進行無菌過濾。

一般情況下，使用了Zell Shield，就不必再額外添加雙抗了。

2）懸浮沖洗法（適合已有支原體污染的細胞）

約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代前，用干凈的PBS懸浮沖洗3次，就能把70%以上的支原體沖洗下來，再通過低速離心，棄上清，即可祛除大部分支原體（離心后細胞沉淀，沖洗下來的支原體在上清中）。再繼續用含1%Zell Shield的培養基持續培養。細胞再連續傳代3次，每次都用PBS對細胞進行懸浮沖洗，并用含1%Zell Shield的培養基培養（見下圖），即可逐漸祛除細胞中的支原體。

另外，需要說明的是ZellShield含有氟喹諾酮類藥物，可與其他抗生素聯合使用，作為耐藥性標記。其他抗生素成分不用作耐藥性標記。

以上就是細胞支原體清除劑ZellShield的使用介紹，北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清，干細胞培養基,馬血清，德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網：www.276mk.com。聯系電話:4006661688。