胎牛血清解凍步驟

細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛的融化解凍方法是剛?cè)腴T細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的同學(xué)必須要會(huì)的，血清解凍步驟失誤導(dǎo)致血清出現(xiàn)沉淀或者渾濁，后期會(huì)細(xì)胞都會(huì)造成一定的影響，所以推薦國(guó)際通用的三步法融化解凍，可盡可能減少沉淀出現(xiàn)，保留血清中因子的活性。具體方法看下圖，有需要的同學(xué)可以保存。

要點(diǎn)一：此三步融化法，適用于所有血清，在水浴過(guò)程中，血清的平面要盡量完全浸在水中，但瓶口不要沒入水中，防治瓶口污染。在融化過(guò)程中要**經(jīng)常慢慢搖動(dòng)瓶身，使血清混勻，但搖動(dòng)不要?jiǎng)×遥M量不要產(chǎn)生泡沫！

要點(diǎn)二：如果你的血清平時(shí)是儲(chǔ)存在-80℃的血清，融化前則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中復(fù)溫（至少24小時(shí)），再使用三步法溶解，避免溫差過(guò)大，更易導(dǎo)致血清中蛋白凝集。

要點(diǎn)三：為**限度保留血清中因子的活性，減少凍融次數(shù)，血清應(yīng)遵循現(xiàn)用現(xiàn)配，現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則。徹底解凍的血清，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。分裝好的血清，密封好后，立即放回-20℃冰箱繼續(xù)冷凍儲(chǔ)存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候，再?gòu)?20℃冰箱中取出一管來(lái)盡快解凍使用（**能全部配成培養(yǎng)基，不要有剩余），配好的培養(yǎng)基在4℃冰箱儲(chǔ)存**不超過(guò)一周。

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