胎牛血清解凍步驟

細胞培養中，胎牛的融化解凍方法是剛入門細胞實驗室的同學必須要會的，血清解凍步驟失誤導致血清出現沉淀或者渾濁，后期會細胞都會造成一定的影響，所以推薦國際通用的三步法融化解凍，可盡可能減少沉淀出現，保留血清中因子的活性。具體方法看下圖，有需要的同學可以保存。

要點一：此三步融化法，適用于所有血清，在水浴過程中，血清的平面要盡量完全浸在水中，但瓶口不要沒入水中，防治瓶口污染。在融化過程中要**經常慢慢搖動瓶身，使血清混勻，但搖動不要劇烈，盡量不要產生泡沫！

要點二：如果你的血清平時是儲存在-80℃的血清，融化前則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中復溫（至少24小時），再使用三步法溶解，避免溫差過大，更易導致血清中蛋白凝集。

要點三：為**限度保留血清中因子的活性，減少凍融次數，血清應遵循現用現配，現配現解凍的原則。徹底解凍的血清，應根據實驗需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。分裝好的血清，密封好后，立即放回-20℃冰箱繼續冷凍儲存。需要配制培養基的時候，再從-20℃冰箱中取出一管來盡快解凍使用（**能全部配成培養基，不要有剩余），配好的培養基在4℃冰箱儲存**不超過一周。

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