細胞凍存步驟詳解和注意事項

細胞凍存是細胞實驗里細胞保存的一種重要技術，可以用于長期保存、運輸細胞以及進行后續的實驗。今天小編就跟大家分享細胞凍存的基本步驟和細胞凍存的注意事項。

細胞凍存的基本步驟：

準備凍存液：制備含有10%-20%的細胞凍存液，常見成分包括甘油、DMSO、胎牛血清（推薦使用內毒素≤3EU/m的Ausbian特級胎牛血清，細胞更健康！）等。這些成分可以保護細胞免受低溫損傷，并防止冰結晶形成。

準備細胞：將細胞培養至80%-90%的密度，用PBS或其他緩沖液洗滌1-2次，以去除細胞碎片和廢棄物。這一步可以確保細胞的健康狀態。

制備細胞懸液：加入適量的凍存液，將細胞懸液均勻分配到凍存管或其他容器中。這一步的目的是將細胞懸浮在凍存液中，以便進行后續的凍存操作。

慢速冷卻：將細胞凍存管或其他容器放置在-20℃等溫慢速冷卻，使細胞漸漸地降溫到-80℃以下。這一步的目的是避免細胞受到過度刺激和損傷。

快速冷凍：將細胞凍存管或其他容器轉移至-80℃的冰箱中，進行快速冷凍。這一步可以確保細胞在低溫下保持穩定狀態。

長期儲存：將凍存的細胞存儲在-80℃或更低溫度的冰箱中，以保持細胞的存活和穩定性。

在進行細胞凍存時，需要注意以下幾點：

確保細胞處于健康狀態，避免使用已經受到損傷或感染的細胞。

嚴格遵守無菌操作規程，避免細胞受到污染。

使用高質量的凍存液和容器，確保細胞的存活和穩定性。

在凍存和儲存過程中，保持低溫環境，避免細胞受到過度刺激和損傷。

總之，細胞凍存是細胞保存的重要技術，正確的操作步驟和注意事項可以確保細胞的存活和穩定性。