德國MB支原體DNA提取試劑盒 Venor GeM Sample preparation Kit使用指南德國MB支原體DNA提取試劑盒使用指南 二維碼
發表時間：2023-09-14 11:21 研究表明，37%的細胞培養上清和幾乎所有的混合細胞培養上清，都存在抑制PCR的物質。因此，在對細胞或者細胞產物，進行支原體PCR檢測前，需要進行DNA提取。今天就跟大家分享德國Minerva-Biolabs?的支原體DNA抽提試劑盒。
產品名稱：支原體DNA抽提試劑盒 英文：Venor?GeM Sample preparation Kit 品牌：Minerva-Biolabs? 貨號：56-1010 規格：10次/盒
支原體DNA抽提試劑盒產品用途，細胞培養基隨著時間的延長，可能積聚抑制PCR的物質。 已知血清含量大于 12%的培養基 對下游操作（例如 PCR）有抑制作用。而且，培養基中的酚紅，對 qPCR 的熒光檢測也可能發生交叉反應，產生假陽性。這些弊端可通過支原體 DNA 提取試劑盒來克服。 從細胞培養物和生物藥中提取支原體 DNA，和支原體檢測試劑盒配套使用。提高支原體檢測的靈敏度、一致性和特異性。
支原體DNA抽提試劑盒作用原理: 該試劑盒對支原體DNA的提取，主要由以下四步組成： 1、細胞裂解 2、DNA 吸附到核酸純化柱上 3、去除殘留污染物和抑制劑 4、DNA 洗脫。此方法無須酚/氯仿抽提，只需 30 分鐘即可完成制備，提供 PCR所需的 DNA。 支原體DNA抽提試劑盒使用方法: 一、樣本要求 支原體 DNA 提取試劑盒可從數量上限為 1X 10^6 細胞/ml，體積上限為 500μl的細胞上清中，直接分離 DNA。 通常，細胞培養物應盡快進行 DNA 抽提。 在 95℃加熱 10 分鐘以使之穩定，繼而在室溫可放 1 周。富含蛋白的樣本（蛋白含量＞10mg/ml）可能需要蛋白酶 K 處理后，再抽提 DNA（請參照后面的流程）。注意，此試劑盒不適于提取真核細胞組織的 DNA。 二、操作步驟 新試劑盒拆封后，向緩沖液 A1 和緩沖液 A2 加入無水乙醇。將恒溫儀設置到 70℃。使緩沖液 E 加熱到 70℃。
1、200μl 樣本+200μl 調節液，渦旋振蕩 10 秒。 2、搖 床 孵 育70℃，10 分鐘。 3、加 400μl 吸附緩沖液，渦旋振蕩 10 秒。
4、將液體轉移到核酸純化柱，離心10000g，1 分鐘，棄掉流過的液體。 5、加500μl緩沖液A1，離心10000g，1 分鐘，棄掉流過的液體。 6、加500μl緩沖液A2，離心10000g，1 分鐘，棄掉流過的液體。
7、**速度離心，3 分鐘 8、換管。 9、加 60μl 緩沖液E，孵育 2 分鐘。
10、離心8000g，2分鐘。 11、DNA即可用于PCR。 三、注意事項 提供的試劑不能和其他批號的試劑混和。 使用的試劑不要超過效期。 規范操作流程，任何提取流程上的偏差都會影響到結果。 我們推薦使用對照品，以驗證結果的可靠性。它也有助于排除故障。 不要使用其他酒精來替代乙醇，它將導致核酸產量的下降。 緩沖液 E 的預熱，會很大程度上改善核酸的產量。 北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清，干細胞培養基,馬血清，德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網：www.276mk.com。聯系電話:4006661688。 |
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