干細胞培養(yǎng)技術(shù)之干細胞標準培養(yǎng)方法分享三種干細胞培養(yǎng)的標準培養(yǎng)方法 二維碼
發(fā)表時間:2023-10-11 14:52 干細胞培養(yǎng)難度大,需要充足的營養(yǎng)成分對其進行支持,對于培養(yǎng)體系及試驗人員的技術(shù)的也有更高的要求。目前常用的標準干細胞培養(yǎng)方法有三種:傳統(tǒng)的飼養(yǎng)層培養(yǎng)法和無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法,以及近幾年新興的干細胞直接培養(yǎng)法。 飼養(yǎng)層培養(yǎng)法,先對飼養(yǎng)層細胞進行培養(yǎng),再將干細胞接種到飼養(yǎng)層細胞上,最后收獲所需的干細胞,該過程需要一周或更長的培養(yǎng)時間。優(yōu)點:培養(yǎng)干細胞效果相對較好;缺點:實驗流程冗雜,使用的試劑復(fù)雜,實驗周期很長,對實驗人員的熟練度有較高要求。 無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法,直接培養(yǎng)干細胞,無需培養(yǎng)飼養(yǎng)層細胞。優(yōu)點:培養(yǎng)流程簡單,缺點:需自行優(yōu)化培養(yǎng)液,有時需要花大力氣去測試血清、培養(yǎng)基及添加因子的種類和比例,非常耗時耗力,且培養(yǎng)出來的干細胞穩(wěn)定性也不太容易保證。 干細胞直接培養(yǎng)法是近幾年,隨著干細胞專用培養(yǎng)基的誕生,逐漸開始的干細胞培養(yǎng)法。干細胞直接培養(yǎng),無飼養(yǎng)層細胞參與。加入的培養(yǎng)液是已經(jīng)商業(yè)標準化的干細胞專用培養(yǎng)基,大多無需配制,可直接使用。優(yōu)點:培養(yǎng)液無需探索配方,可直接使用;實驗流程簡單。缺點:由于不同廠家的干細胞專用培養(yǎng)基的配方不同,所以有相當多的干細胞挑不到合適的完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)效果不好。很多價格昂貴,是傳統(tǒng)培養(yǎng)液(胎牛+普通培養(yǎng)基+添加細胞因子)數(shù)倍。 但隨著新技術(shù)的不斷革新,近兩年出現(xiàn)的一款Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基,以其方便,通用,價格等優(yōu)勢,基本規(guī)避以上缺點,被越來越多的實驗人員所使用。 1、它是即用型干細胞培養(yǎng)基,解凍后開瓶即用,無需二次配制 2、一款培養(yǎng)可應(yīng)用在各類干細胞培養(yǎng)中,效果理想,如長期培養(yǎng),仍可較好地保留細胞的干性; 3、價格適中,與胎牛血清+基礎(chǔ)培養(yǎng)基+細胞因子這類傳統(tǒng)培養(yǎng)體系相比,價格略高或價格相當。 Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基的工作原理,在含微量胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,添加一種人永生化干細胞系的條件培養(yǎng)基混合物,共同組成,其中已含有EGF、FGF、NGF、HGF、BDNF、PDGF、VEGF、TGF及干細胞分化抑制因子等成分,且為天然比例,更符合干細胞生長繁殖的自然規(guī)律,對于各類干細胞具有通用性,且培養(yǎng)效果滿意。 這款Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基,可長期儲存在-20℃冰箱中,一年以上。在使用時,無需額外添加細胞因子或其他人工合成促生長成分,無需二次配制,解凍后即可直接使用,根據(jù)細胞生長情況每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基即可,實驗人員簡單方便地即可完成促進干細胞增殖、延緩干細胞分化及維持干細胞表型,增加干細胞的傳代次數(shù)的目的,在人及動物的胚胎干細胞、間充質(zhì)干細胞及各種組織來源的成體干細胞的培養(yǎng)中均可使用。由于實驗步驟大幅精簡,因此對實驗人員的操作技術(shù)也相對不會過為嚴苛。 通過實驗發(fā)現(xiàn),Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基能夠有效維持干細胞的干性,延緩干細胞的分化。養(yǎng)出純度更高、遺傳物質(zhì)更穩(wěn)定的干細胞! 所培養(yǎng)的干細胞。在培養(yǎng)細胞有效性方面,許多科研人員對其進行了評估:培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞可以細胞傳代次數(shù) 8-10 次、培養(yǎng)成體干細胞可以使細胞的增殖速率增加 300%,實驗數(shù)據(jù)真實可靠。 需要說明的是,由于此款培養(yǎng)基添加了1.5%-2%左右的胎牛血清(經(jīng)過輻照),Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基更適用于科研領(lǐng)域,在細胞治療等臨床項目中應(yīng)用時,申報工作需做特別說明。 由于干細胞專用培養(yǎng)基的出現(xiàn),讓干細胞培養(yǎng)變得更簡單;而Ausbian干細胞完全培養(yǎng)基的出現(xiàn),讓干細胞的培養(yǎng)變得更容易。相信隨著科技的飛速發(fā)展和不斷涌現(xiàn)的創(chuàng)新產(chǎn)品,會有越來越多的干細胞新型培養(yǎng)工具得以應(yīng)用,讓人類在研究和探索干細胞領(lǐng)域的道路上,走得更高更遠。 北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養(yǎng)實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清,干細胞培養(yǎng)基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問締一生物官網(wǎng):www.276mk.com。聯(lián)系電話:4006661688。 |
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