支原體去除劑在動物細胞培養中使用方法

哺乳動物細胞的培養中支原體(Mycoplasma)污染是個比較嚴重的問題。因為支原體污染幾乎可以改變細胞的所有參數，導致實驗結果的不準確、甚至完全錯誤。所以支原體祛除劑對細胞培養實驗室中也是常備產品之一。締一生物提供的德國MB支原體去除劑Zell Shield可直接加入培養基中使用，詳細使用使用方法見下文。

Zell Shield支原體去除劑的使用方法：

1）常規使用

Zell Shield為-18℃避光保存。使用前，建議融化分裝。避免反復凍融。Zell Shield按1:100直接加入到新鮮配制的培養基。

例如：500ml培養基中添加5ml Zell Shield，混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃進行培養時，最多7天需要更換新的含有Zell Shield的培養基，以獲得良好的保護。

說明：Zell Shield在培養基過濾前或過濾后加均可。如果培養基尚未無菌過濾，可在加入Zellshield后再進行無菌過濾。

一般情況下，使用了Zell Shield，就不必再額外添加雙抗了。

2）懸浮沖洗法（適合已有支原體污染的細胞）

約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代前，用干凈的PBS懸浮沖洗3次，就能把70%以上的支原體沖洗下來，再通過低速離心，棄上清，即可祛除大部分支原體（離心后細胞沉淀，沖洗下來的支原體在上清中）。再繼續用含1%Zell Shield的培養基持續培養。細胞再連續傳代3次，每次都用PBS對細胞進行懸浮沖洗，并用含1%Zell Shield的培養基培養（見下圖），即可逐漸祛除細胞中的支原體。

另外，需要說明的是ZellShield含有氟喹諾酮類藥物，可與其他抗生素聯合使用，作為耐藥性標記。其他抗生素成分不用作耐藥性標記。

北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清，干細胞培養基,馬血清，德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網：www.276mk.com。聯系電話:4006661688。