細胞傳代中,胰蛋白酶中為何要加EDTA?

細胞傳代中,胰蛋白酶中為何要加EDTA?

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發表時間:2023-11-10 15:31

在細胞傳代過程中,使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么呢?今天小編就跟大家詳細解答一下。
EDTA作用較胰蛋白酶緩和,主要作用在于能從組織生存環境中吸取Ca2+Mg2+,這些離子是維持組織完整的重要因素。但EDTA單獨使用不能使細胞完全分散,因而常與胰蛋白酶按不同比例混合使用,效果較好。常用比例為11或者2EDTA1份胰蛋白酶。EDTA的工作液濃度為0.02%,用不含Ca2+、Mg2+BSS配置。如果使用EDTA,在終止消化前,需用緩沖液將消化液清除后才能加培養液。第1次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于20 ℃,避免反復冷凍解凍造成胰蛋白酶的活性降低,并可減少污染的機會。

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