幾項研究證明,細胞支原體污染對細胞實驗的影響

細胞支原體污染對細胞實驗的影響

 二維碼
發表時間:2023-12-26 15:41

細胞培養實驗是生物科研的基礎實驗,也就是相當于“地基”,“地基”的穩固很重要,所以對于細胞污染對細胞實驗來說是很危險的信號,尤其是支原體污染。由于支原體是一類細小的微生物,可以感染人類和動物細胞,對細胞實驗的結果產生嚴重影響,引發了廣泛的關注。

影響細胞脂類代謝

研究人員以不同濃度的肺炎支原體處理人肺癌上皮細胞,不同時間后提取胞膜及表面的鞘脂類,應用基質輔助激光解吸附飛行時間質譜一進行分析應用RT-PCR和免疫熒光方法,檢測鞘脂類代謝通路中兩個關鍵酶的變化。

實驗結果:

肺炎支原體和細胞大多數鞘脂類組成成分相同;感染能影響細胞的鞘脂類代謝,包括誘導新種類的神經酞胺的生成,升高或降低某些神經酞胺的濃度,在一定濃度和時間點能誘導酸性鞘磷脂酶的聚簇和絲氨酸棕擱酞轉移酶的變化。

對黑色素瘤細胞的影響

在研究早期傳代黑色素瘤細胞系中的干細胞樣特性時,研究人員注意到感染了豬鼻支原體的細胞系的實驗組的可重復性差。

研究人員用支原體感染其他黑色素瘤細胞系.研究發現,支原體感染在培養中會產生多形性效應,從細胞凋亡到增強的致瘤性和侵襲性,并且會造成相當大的資源浪費和實驗結果解釋的混亂[2]。

細胞

誘導細胞產生炎癥因子

在一項研究中,研究人員利用肺炎支原體感染A549細胞。

研究發現發現,肺炎支原體能刺激A549細胞分泌TNF-α, 其產生水平與刺激時間具有量的正相關性;肺炎支原體還能刺激A549細胞分泌IL-8, 其產生水平與刺激時間亦具有量的正相關性。而被支原體感染的A549細胞分泌TNF-α和IL-8可能與NF-κB的激活有關。

誘導細胞氧化應激

在這項研究中,研究人員利用多巴胺能神經元細胞系(BE-M17),使用單細胞凝膠電泳(彗星試驗),來評估支原體感染對基因組不穩定性和堿基切除修復(BER)活性的影響。

結果表明,與未感染的細胞相比,支原體感染在沒有炎癥反應的情況下誘導氧化應激,DNA損傷水平(鏈斷裂/堿不穩定位點(SB/ALS)和氧化嘌呤)顯著增加。未感染細胞修復SB/ALS的速度比感染細胞更快。未感染的細胞在24小時內就能修復氧化嘌呤,而感染的細胞在30小時后也不能修復。

總之,本研究表明,支原體感染不僅會誘導氧化應激和DNA損傷,而且還會降低負責氧化損傷DNA修復的主要途徑,即BER的效率


如何能祛除細胞中的支原體呢?

可使用德國MB Zell Shield? 細胞支原體祛除試劑

對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經過體外刺激),如果細胞中發現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,推薦使用MB公司生產的復合抗生素Zell Shield?。

Zell Shield 800.png

細胞祛除支原體試劑Zell Shield特點

(1)高效廣譜。Zell Shield?通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。   

(2)安全。無細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無毒。     

(3)活性穩定。在細胞培養期間,Zell Shield?始終保持穩定的活性。     

(4)使用方便。Zell Shield?為無菌溶液,可直接加入培養基使用。

注意:

①每次使用Zell Shield?之前,務必先用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理細胞,這樣才能達到更好的支原體祛除效果。

②在祛除細胞支原體污染的過程中,需要環境、試劑及耗材確保潔凈,無新的支原體污染加入。

只要如法操作,在使用Zell Shield?四代后,細胞中的支原體即可祛除。


引用文獻

[1]郁園園. 肺炎支原體感染干擾人肺癌上皮細胞A549的脂類代謝[D],2008.

[2]Ji Y, Karbaschi M, Cooke MS. Mycoplasma infection of cultured cells induces oxidative stress and attenuates cellular base excision repair activity. Mutat Res Genet Toxicol Environ Mutagen. 2019;845:403054. doi:10.1016/j.mrgentox.2019.05.010

[3]肺炎支原體誘導A549細胞分泌腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-8的相關性[J],2009,30(02):188-190+194.

相關閱讀
最新動態