支原體檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證步驟

支原體檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證主要包括以下幾個(gè)步驟：

實(shí)驗(yàn)原理驗(yàn)證：確認(rèn)所選支原體檢驗(yàn)方法的原理是否可靠，是否經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證，并具有較高的敏感性和特異性。

試劑和耗材驗(yàn)證：對(duì)所使用的試劑和耗材進(jìn)行驗(yàn)證，確保其質(zhì)量和適用性。特別注意試劑和耗材的儲(chǔ)存和使用條件，以及其有效期。

樣本收集和制備：驗(yàn)證樣本的收集和制備方法，確保樣本的代表性和可靠性。同時(shí)，注意樣本的保存和運(yùn)輸條件，避免污染和交叉污染。

陽(yáng)性陰性結(jié)果判定：驗(yàn)證陽(yáng)性結(jié)果和陰性結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)，并確定臨界值?？梢圆捎靡阎?yáng)性樣本和陰性樣本進(jìn)行驗(yàn)證，以確認(rèn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

重復(fù)性和穩(wěn)定性驗(yàn)證：對(duì)所選支原體檢驗(yàn)方法的重復(fù)性和穩(wěn)定性進(jìn)行驗(yàn)證，以評(píng)估其可重復(fù)性和可靠性?？梢圆捎枚鄠€(gè)樣本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，并計(jì)算檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)（CV）等指標(biāo)。

參考標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比：將所選支原體檢驗(yàn)方法與參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，以評(píng)估其準(zhǔn)確性和可靠性。參考標(biāo)準(zhǔn)可以是國(guó)際或國(guó)內(nèi)公認(rèn)的方法或標(biāo)準(zhǔn)品。

臨床應(yīng)用評(píng)估：在實(shí)際應(yīng)用中評(píng)估所選支原體檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性和可靠性，并與臨床診斷結(jié)果進(jìn)行比較，以確定其臨床應(yīng)用價(jià)值。

數(shù)據(jù)分析和解讀：對(duì)驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，解讀各項(xiàng)指標(biāo)的意義和優(yōu)劣，并根據(jù)結(jié)果優(yōu)化所選支原體檢驗(yàn)方法。

總之，支原體檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證是一個(gè)系統(tǒng)的過(guò)程，需要從多個(gè)方面對(duì)所選方法進(jìn)行評(píng)估和驗(yàn)證。

德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒（均為探針?lè)z測(cè)），依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別， 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品，具有以下獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無(wú)交叉反應(yīng)）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品，便于方法學(xué)驗(yàn)證。

⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。