實(shí)時(shí)熒光定量PCR和qPCR之間的區(qū)別是什么

實(shí)時(shí)熒光定量PCR和qPCR之間的區(qū)別

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發(fā)表時(shí)間:2024-04-07 15:32

實(shí)時(shí)熒光定量PCRQuantitative Real-time PCR)和qPCR實(shí)際上是同一種技術(shù)的不同稱謂,它們之間沒有本質(zhì)的區(qū)別。實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,用于對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。這種技術(shù)通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR的原理是在PCR擴(kuò)增過程中,通過熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物的量的變化,并進(jìn)行定量分析。這種技術(shù)通過在反應(yīng)體系中加入熒光探針或熒光染料,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化,從而計(jì)算出目標(biāo)分子的拷貝數(shù)。

因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCRqPCR是同一技術(shù)的不同表述,它們都是用于核酸檢測(cè)和定量分析的金標(biāo)準(zhǔn),主要應(yīng)用于DNAcDNA的定量分析,如基因表達(dá)分析、病毒載量檢測(cè)等。如需了解更多信息,可以查閱生物學(xué)、分子生物學(xué)或相關(guān)領(lǐng)域的專業(yè)書籍和文獻(xiàn)。

德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒(均為探針法檢測(cè)),依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別, 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品,具有以下獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn):

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性,一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),根據(jù)序列一致性,至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性,其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性,無交叉反應(yīng))。


③高靈敏度,MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品,便于方法學(xué)驗(yàn)證。

MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA,便于特異性驗(yàn)證。

MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品,便于最后定量檢測(cè)。



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