熒光定量PCR和數字PCR的區別

熒光定量PCR vs 數字PCR

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發表時間:2024-04-15 14:25

數字PCR和熒光定量PCR區別如下:

原理:

數字PCR是將標準PCR反應分配到數萬至數十萬微液滴中,每個微液滴不包含或包含一個拷貝目標(DNA模板),實現單分子模板PCR擴增,擴增結束后,對呈現陰、陽性微液滴數目進行統計學分析,由泊松分布計算出靶分子的起始拷貝數,實現起始DNA模板的絕對定量和超靈敏檢測。

熒光定量PCR是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。

應用:

數字PCR主要應用于液體活檢、拷貝數量變化分析、檢測少量病原體、檢測罕見基因突變、無創產前診斷、食品轉基因檢測、環境檢測、第二代測序文庫分析等。

熒光定量PCR主要應用于病原體的檢測和定量、基因表達的相對檢測、單核苷酸多態性分析、腫瘤標志物的檢測等。

優缺點:

數字PCR的優點是絕對定量、無標準曲線、靈敏度高、對PCR抑制劑的耐受性更高,缺點是動態范圍窄、成本高。

熒光定量PCR的優點是動態范圍寬、應用范圍廣、成本低,缺點是擴增效率容易受到PCR抑制劑的影響。

綜上所述,數字PCR和熒光定量PCR在原理、應用和優缺點方面存在明顯的區別。選擇使用哪種技術取決于具體的實驗需求和條件。

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