熒光定量PCR和數(shù)字PCR的區(qū)別

數(shù)字PCR和熒光定量PCR區(qū)別如下：

原理：

數(shù)字PCR是將標準PCR反應(yīng)分配到數(shù)萬至數(shù)十萬微液滴中，每個微液滴不包含或包含一個拷貝目標（DNA模板），實現(xiàn)“單分子模板PCR擴增”，擴增結(jié)束后，對呈現(xiàn)陰、陽性微液滴數(shù)目進行統(tǒng)計學(xué)分析，由泊松分布計算出靶分子的起始拷貝數(shù)，實現(xiàn)起始DNA模板的絕對定量和超靈敏檢測。

熒光定量PCR是通過對PCR擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測從而實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析。

應(yīng)用：

數(shù)字PCR主要應(yīng)用于液體活檢、拷貝數(shù)量變化分析、檢測少量病原體、檢測罕見基因突變、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷、食品轉(zhuǎn)基因檢測、環(huán)境檢測、第二代測序文庫分析等。

熒光定量PCR主要應(yīng)用于病原體的檢測和定量、基因表達的相對檢測、單核苷酸多態(tài)性分析、腫瘤標志物的檢測等。

優(yōu)缺點：

數(shù)字PCR的優(yōu)點是絕對定量、無標準曲線、靈敏度高、對PCR抑制劑的耐受性更高，缺點是動態(tài)范圍窄、成本高。

熒光定量PCR的優(yōu)點是動態(tài)范圍寬、應(yīng)用范圍廣、成本低，缺點是擴增效率容易受到PCR抑制劑的影響。

綜上所述，數(shù)字PCR和熒光定量PCR在原理、應(yīng)用和優(yōu)缺點方面存在明顯的區(qū)別。選擇使用哪種技術(shù)取決于具體的實驗需求和條件。