花一樣的錢,如何挑好的胎牛血清?

如何挑好的胎牛血清?

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發表時間:2024-07-25 15:18

  細胞實驗室的老師都知道,血清的質量對細胞生長至關重要。但是剛進入實驗室的同學可能不太了解,今天跟大家分享就是如何花一樣的錢,挑選好的胎牛血清

  血清在細胞培養中起到如下作用:

  1. 提供細胞生長代謝所需的生長因子、激素等活性成分和各種營養物質;

  2. 提供結合蛋白,通過結合維生素、脂質、微量元素和激素等成分,調節這些成分的釋放與活性;

  3. 解毒和抗氧化功能;

  4. 提供細胞貼壁所需的細胞外基質成分;

  5. 緩沖細胞培養基的酸堿度。

  動物血清包括:胎牛血清、新生牛血清、豬血清、馬血清等。其中胎牛血清最為常用。

 胎牛血清(簡稱 FBS):采自懷孕 5-8 個月母牛中的胎牛。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有各種促進生長發育的因子,適合各種細胞生長,特別是干細胞,神經細胞,或需要轉染、融合的細胞。

  新生牛血清(簡稱NCS):采自出生一天至一周內的新生牛。

(注意,牛胚胎到了孕晚期,各臟器逐漸發育完全,很多促進細胞生長發育的重要因子會自動消失。因此孕晚期的胎牛一直到出生后的新生牛、小牛,血清中因子會少了許多,成分和胎牛血清有很大的不同。)

  胎牛血清和新生牛血清,成分、適用范圍均不相同,通常新生牛血清的價格會便宜很多。

所以就要看養的細胞哪種細胞,比如:干細胞,神經細胞,或需要轉染、融合的細胞免疫細胞等,這種就需要用到胎牛血清。選對了血清,就是省錢。

  選對血清類型,下一步就要挑生產質量好的買,才能養好細胞。

  血清的質控是否合格,首先要要看《檢測報告》。不但細菌、真菌、支原體、病毒的檢測必須為陰性,而且《檢測報告》中的內毒素(Endotoxin)的多少,是未來保證細胞不會發生「慢性中毒」的一個重要指標。內毒素要小于 10EU/ml,**小于 3EU/ml,而且越低越好。

  內毒素:是革蘭氏陰性菌的細胞壁成分。它的毒性可以直接參與細胞凋亡。內毒素含量高,容易導致細胞「亞健康」,造成數據不準,甚至老化、死亡,試驗失敗。

  因此,《檢測報告》中內毒素的值越低越好。

  世界細胞培養學會,依據內毒素對血清進行分級,內毒素含量越低的血清,級別就越高

  以胎牛血清為例:

  當血清中內毒素含量≤ 10EU/ml 時,此血清為特級胎牛血清;

  當血清中內毒素含量﹥10EU/ml≤ 25EU/ml 時,此血清為優級胎牛血清;

  當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml 時,此血清為標準級胎牛血清;

  目前,由于同一廠家不同批次的血清,內毒素數值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別。但使用者仍可通過《檢測報告》,自行甄別挑選。

  注意:內毒素對細胞的影響,很多時候通過短期的試用是看不出來的。

  因此,選擇好血清的正確動作:先看《檢測報告》,內毒素等指標優質,再開始試用。

  血清出廠前的質控,還包括理化性質的檢查(如外觀、pH 值、滲透壓)以及促細胞生長能力檢查等。這些都是細胞培養效果的重要保證。


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