實(shí)驗(yàn)失敗都是吸取細(xì)胞污染教訓(xùn)的過程

買的細(xì)胞回來先復(fù)蘇細(xì)胞，復(fù)蘇完細(xì)胞以后就在顯微鏡下觀察一下，如果細(xì)胞背景有黑色的話，那說明細(xì)胞本來就是臟的。就不建議培養(yǎng)了。
但是如果復(fù)蘇了一天以后再去看才發(fā)現(xiàn)背景有黑膠蟲在動，這個時候就需要排除很多因素了，比如說是否細(xì)胞本來就是污染的，是否是完培污染了，是否是操作不當(dāng)。
但是如果第1天看了的話，至少可以排出一個選項(xiàng)，那就是細(xì)胞本身是不是就是污染的，跟我們操作關(guān)系就沒有那么大大了，至少會給點(diǎn)信心。
細(xì)胞復(fù)蘇后發(fā)現(xiàn)污染了，需要根據(jù)污染的類型和程度來采取相應(yīng)的處理措施。以下是一些一般性的建議：

識別污染類型細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型包括細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染以及交叉污染等。不同類型的污染具有不同的特征，如細(xì)菌污染通常會導(dǎo)致培養(yǎng)液渾濁變黃，真菌污染則可能形成點(diǎn)狀菌落或絲狀物，而支原體污染則可能較為隱蔽，細(xì)胞病變不明顯。

處理措施

立即隔離：一旦發(fā)現(xiàn)污染，應(yīng)立即將污染的細(xì)胞與未污染的細(xì)胞隔離開來，防止污染擴(kuò)散。

評估污染程度：觀察污染的嚴(yán)重程度，如果污染較輕且細(xì)胞狀態(tài)尚好，可以嘗試挽救；如果污染嚴(yán)重或細(xì)胞狀態(tài)不佳，則建議直接丟棄。

針對不同污染類型的處理：

細(xì)菌污染：可以使用抗生素處理，如鏈霉素、青霉素等。但需注意抗生素的濃度和使用時間，以免對細(xì)胞造成不必要的傷害。

真菌污染：可以使用抗真菌藥物，如兩性霉素B、制霉菌素或放線菌素D等。同樣需要注意藥物的濃度和使用方法。

支原體污染：支原體污染較難處理，且處理代價較大。如果細(xì)胞不是非常重要，建議直接丟棄。如果必須挽救，可以嘗試使用支原體清除劑，但效果可能有限。

病毒污染：病毒污染的處理更為復(fù)雜，通常需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室條件和設(shè)備。如果懷疑有病毒污染，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并咨詢專業(yè)人士。

清潔和消毒：對污染的培養(yǎng)器具、試劑和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行徹底的清潔和消毒，以防止污染再次發(fā)生。

記錄和分析：詳細(xì)記錄污染的情況、處理過程和結(jié)果，以便分析污染的原因并采取相應(yīng)的預(yù)防措施。

預(yù)防措施

為了防止細(xì)胞復(fù)蘇后發(fā)生污染，可以采取以下預(yù)防措施：

嚴(yán)格的無菌操作：在細(xì)胞復(fù)蘇和培養(yǎng)的整個過程中，必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，包括使用無菌器具、試劑和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境等。

定期檢測：對培養(yǎng)基、試劑和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行定期檢測，以確保其無菌狀態(tài)。

使用高質(zhì)量的試劑和器具：選擇來自可靠供應(yīng)商的高質(zhì)量試劑和器具，以降低污染的風(fēng)險。

注意實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生：保持實(shí)驗(yàn)室的清潔和整潔，定期清理和消毒實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和環(huán)境。

合理儲存和復(fù)蘇細(xì)胞：在細(xì)胞儲存和復(fù)蘇過程中，要注意避免污染源的引入，如使用無菌的凍存管和復(fù)蘇液等。

綜上所述，細(xì)胞復(fù)蘇后發(fā)現(xiàn)污染了需要根據(jù)污染的類型和程度來采取相應(yīng)的處理措施，并加強(qiáng)預(yù)防措施以防止污染再次發(fā)生。