保存在負(fù)80的胎牛血清如何解凍

對(duì)于保存在-80℃的胎牛血清，解凍時(shí)需要遵循一定的步驟以確保其質(zhì)量不受損。以下是一個(gè)推薦的解凍方法：

三步法（梯度解凍法）

預(yù)解凍：

將血清從-80℃冰箱中取出，先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中放置至少24小時(shí)，這一步是為了減小溫差，避免直接升溫導(dǎo)致的血清成分失活。

部分解凍：

將血清從-20℃冰箱中取出，然后置于28℃冰箱中放置1224小時(shí)，使其部分融解。

完全解凍：

將血清從28℃冰箱中取出，置于室溫（1625℃）下，讓其全部融解。在融解過程中，需要規(guī)則地輕柔混勻血清，但應(yīng)避免產(chǎn)生泡沫。同時(shí)，可以輕微搖晃血清瓶，以避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚產(chǎn)生絮狀物。

注意事項(xiàng)

避免溫差過大：

切勿直接將血清從-80℃轉(zhuǎn)移至室溫或進(jìn)行37℃、56℃溫水浴解凍，以免溫差過大導(dǎo)致血清產(chǎn)生沉淀，影響品質(zhì)。

處理絮狀物：

如果在解凍過程中血清析出絮狀物，這通常是血清中的纖維蛋白，屬于正常現(xiàn)象，對(duì)后續(xù)培養(yǎng)無害，無需去除。但如果需要去除，可以采用400g/1~2分鐘離心的方法，或?qū)⒊恋碜匀怀恋碓谄孔拥撞亢螅⌒牡貙⒀遛D(zhuǎn)移至無菌瓶中。不建議采用過濾方式去除。

及時(shí)使用或儲(chǔ)存：

解凍后的血清如果一次無法用完，應(yīng)將其分裝在無菌、無熱原的容器內(nèi)密封冷凍儲(chǔ)存。已開封或分裝后的血清，建議當(dāng)即配制使用或密封冷凍儲(chǔ)存，以避免長(zhǎng)時(shí)間冷藏或常溫下放置導(dǎo)致噬菌體產(chǎn)生。

無菌操作：

在進(jìn)行血清分裝時(shí)，應(yīng)穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴一次性手套，并嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作流程，以防止細(xì)菌污染。

遵循上述步驟和注意事項(xiàng)，可以確保保存在-80℃的胎牛血清在解凍過程中保持其品質(zhì)，為后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定的支持。