保存在負80的胎牛血清如何解凍

對于保存在-80℃的胎牛血清，解凍時需要遵循一定的步驟以確保其質量不受損。以下是一個推薦的解凍方法：

三步法（梯度解凍法）

預解凍：

將血清從-80℃冰箱中取出，先轉移至-20℃冰箱中放置至少24小時，這一步是為了減小溫差，避免直接升溫導致的血清成分失活。

部分解凍：

將血清從-20℃冰箱中取出，然后置于28℃冰箱中放置1224小時，使其部分融解。

完全解凍：

將血清從28℃冰箱中取出，置于室溫（1625℃）下，讓其全部融解。在融解過程中，需要規則地輕柔混勻血清，但應避免產生泡沫。同時，可以輕微搖晃血清瓶，以避免血清中的蛋白物質凝聚產生絮狀物。

注意事項

避免溫差過大：

切勿直接將血清從-80℃轉移至室溫或進行37℃、56℃溫水浴解凍，以免溫差過大導致血清產生沉淀，影響品質。

處理絮狀物：

如果在解凍過程中血清析出絮狀物，這通常是血清中的纖維蛋白，屬于正?，F象，對后續培養無害，無需去除。但如果需要去除，可以采用400g/1~2分鐘離心的方法，或將沉淀自然沉淀在瓶子底部后，小心地將血清轉移至無菌瓶中。不建議采用過濾方式去除。

及時使用或儲存：

解凍后的血清如果一次無法用完，應將其分裝在無菌、無熱原的容器內密封冷凍儲存。已開封或分裝后的血清，建議當即配制使用或密封冷凍儲存，以避免長時間冷藏或常溫下放置導致噬菌體產生。

無菌操作：

在進行血清分裝時，應穿實驗服、佩戴一次性手套，并嚴格遵守無菌操作流程，以防止細菌污染。

遵循上述步驟和注意事項，可以確保保存在-80℃的胎牛血清在解凍過程中保持其品質，為后續的細胞培養實驗提供穩定的支持。