體外細胞培養(yǎng)時使得細胞存活的條件

體外細胞培養(yǎng)過程中遇到污染時，需要根據(jù)污染的類型和程度采取相應的處理措施。以下是一些常見的污染類型及其處理方法：

一、細菌污染

細菌污染是體外細胞培養(yǎng)中最常見的污染類型之一。當發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變渾濁、pH值改變或細胞生長受到抑制時，應懷疑是否存在細菌污染。

處理方法：

更換培養(yǎng)基：立即更換受污染的培養(yǎng)基，并使用無菌技術(shù)進行操作。

使用抗生素：根據(jù)污染的細菌種類選擇適當?shù)目股剡M行處理。但需要注意，抗生素可能對細胞產(chǎn)生毒性，因此應謹慎使用。

加強清潔與消毒：對實驗室環(huán)境、實驗器材和培養(yǎng)箱等進行徹底的清潔和消毒。

二、真菌污染

真菌污染在體外細胞培養(yǎng)中也較為常見，尤其是煙曲霉、黑曲菌、白色念珠菌等。真菌污染通常會導致培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點，并形成絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲。

處理方法：

更換培養(yǎng)基：立即更換受污染的培養(yǎng)基，并徹底清洗和消毒培養(yǎng)器皿。

使用抗真菌藥物：如制霉菌素、酮康唑等，這些藥物可以抑制真菌的生長和繁殖。

加強環(huán)境控制：減少空氣流動，保持培養(yǎng)室和操作室的干燥和清潔，定期對工作區(qū)域進行消毒。

三、支原體污染

支原體污染是一種嚴重的細胞污染類型，由于支原體缺乏細胞壁且營養(yǎng)要求高，因此難以用傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法檢測到。支原體污染通常不會導致培養(yǎng)液渾濁和pH值改變，但會吸附于細胞表面或散在于細胞之間，對細胞生長產(chǎn)生抑制作用。

處理方法：

使用支原體清除劑：如zell shield細胞支原體清除劑試劑可以有效地清除支原體污染。

高溫處理：對于某些對熱耐受性較差的支原體，可以嘗試使用高溫處理（如41℃作用5~10小時）來破壞支原體。但需要注意，高溫處理可能對細胞產(chǎn)生一定的損傷。

更換培養(yǎng)基和器材：使用支原體陰性的培養(yǎng)基和無菌器材進行培養(yǎng)，以避免再次污染。

四、病毒污染

病毒污染在體外細胞培養(yǎng)中相對較少見，但一旦發(fā)生，可能對細胞培養(yǎng)產(chǎn)生嚴重影響。病毒污染通常難以發(fā)現(xiàn)和清除，且對實驗人員構(gòu)成潛在威脅。

處理方法：

加強個人防護：實驗人員應穿戴適當?shù)姆雷o服和手套，避免直接接觸受污染的細胞和培養(yǎng)基。

使用抗病毒藥物：某些抗病毒藥物可以抑制病毒的生長和繁殖，但需要根據(jù)病毒的種類選擇適當?shù)乃幬铩?/span>

丟棄受污染的細胞：如果病毒污染嚴重且無法清除，應考慮丟棄受污染的細胞，并重新進行細胞培養(yǎng)。

五、其他微生物污染

除了上述常見的污染類型外，還可能存在其他微生物污染，如酵母、噬菌體等。這些微生物污染的處理方法類似于細菌或真菌污染的處理方法。

六、預防措施

為了預防體外細胞培養(yǎng)過程中的污染，可以采取以下措施：

嚴格無菌操作：實驗人員應嚴格遵守無菌操作規(guī)程，使用無菌器材和試劑進行培養(yǎng)。

加強實驗室管理：定期對實驗室環(huán)境、設備和器材進行清潔和消毒，保持實驗室的整潔和衛(wèi)生。

定期檢測：定期對細胞培養(yǎng)物進行污染檢測，及時發(fā)現(xiàn)并處理污染問題。

使用抗生素或抗真菌藥物預防：在某些情況下，可以使用適當?shù)目股鼗蚩拐婢幬飦眍A防污染的發(fā)生。但需要注意，這些藥物可能對細胞產(chǎn)生毒性作用，因此應謹慎使用。

綜上所述，體外細胞培養(yǎng)過程中遇到污染時，需要根據(jù)污染的類型和程度采取相應的處理措施。同時，加強預防措施的落實也是降低污染風險的重要手段。