FBS胎牛血清使用方法

FBS（Fetal Bovine Serum）胎牛血清是從胎牛的血液中提取的一種補充劑，廣泛用于細胞培養基中，提供必需的營養物質和生長因子，支持細胞的生長和繁殖。以下是FBS胎牛血清的使用方法：

一、預處理

解凍：將FBS胎牛血清從-20℃或-80℃冰箱中取出，置于4℃冰箱內過夜解凍，使血清均勻緩慢融化。解凍后，將血清在室溫下短暫平衡，以避免溫度驟變影響其活性。

滅菌過濾：為確保血清無菌，解凍后的血清需要經過0.22微米的過濾膜過濾，去除可能的微生物或顆粒污染物。

二、加入

確定濃度：FBS胎牛血清的加入量因實驗需求而異，但通常的濃度在5%到20%之間。FBS胎牛血清的濃度影響細胞生長速度和形態，不同的細胞系對血清濃度的要求可能不同，因此可以根據實驗細胞的特性進行濃度調整。

混合培養基：在混合培養基時，將經過過濾的FBS胎牛血清按所需比例緩慢加入培養基，輕柔混勻，以避免產生氣泡或沉淀。

試用實驗：對新購置的血清批次進行小規模的試用實驗，確認其效果穩定性后再用于大規模實驗，從而確保實驗結果的可靠性。

三、保存

長期保存：新購入的FBS胎牛血清應保存在-20℃或更低溫度的冷凍環境中。

分裝保存：解凍后的血清需分裝成小份量并置于-20℃以減少反復凍融帶來的活性損失。反復凍融會導致血清中蛋白質的沉淀，從而降低血清的效能，因此分裝保存能夠延長血清的有效期和活性。

四、注意事項

批次差異：FBS胎牛血清的使用效果可能會受到批次差異的影響。不同批次的FBS胎牛血清來源可能不同，其成分略有差異，尤其是生長因子和激素的含量差異可能顯著影響細胞的生長特性。實驗中，通常推薦購買大批量同批次的FBS胎牛血清，以減少批次差異對實驗的影響。如需更換批次，應做好批次間的效果比對，以確保培養條件的一致性。

無菌操作：在處理和使用FBS胎牛血清時，應嚴格遵守無菌操作規程，以防止微生物污染。

綜上所述，FBS胎牛血清的使用方法包括預處理、加入、保存和注意事項等方面。正確使用FBS胎牛血清可以為細胞提供必要的營養物質和生長因子，支持細胞的生長和繁殖，從而確保實驗結果的準確性和可靠性。