胎牛血清透析之后可用于什么實驗? 二維碼
發(fā)表時間:2025-01-14 16:19 胎牛血清是從采自5~8月齡牛胚胎的血液中分離得到的血清,營養(yǎng)豐富,含有三四百種不同成分,這些成分對于細(xì)胞生長至關(guān)重要。胎牛血清常用于細(xì)胞培養(yǎng),能夠為細(xì)胞提供必要的生長條件和支持細(xì)胞增殖。然而,在某些特定的細(xì)胞實驗中,普通胎牛血清可能無法滿足實驗需求,因此需要使用透析胎牛血清。透析胎牛血清是在普通胎牛血清的基礎(chǔ)上,通過透析處理去除分子量在1萬以下的小分子物質(zhì)(如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素等)而得到的。這一處理過程使得透析胎牛血清在保留大分子營養(yǎng)成分的同時,降低了小分子物質(zhì)的含量,從而減少了這些物質(zhì)對細(xì)胞培養(yǎng)的干擾。透析胎牛血清因其特殊的處理工藝和性質(zhì),在多種細(xì)胞實驗中扮演著不可或缺的角色,具體可用于以下實驗: 同位素標(biāo)記實驗:同位素標(biāo)記技術(shù),例如Stable isotope labeling with amino acids in cell culture(SILAC),是一種基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)。它通過將13C或15N標(biāo)記的氨基酸引入培養(yǎng)基,標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì),用于比較不同處理下的細(xì)胞蛋白質(zhì)豐度。透析胎牛血清可用于排除天然氨基酸的干擾,以確保標(biāo)記氨基酸的準(zhǔn)確性。 工程細(xì)胞株的篩選:例如,CHO-DFGRˉ細(xì)胞株需要在培養(yǎng)基中添加次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸才能生存。透析胎牛血清可用作選擇培養(yǎng)基的一部分,以幫助篩選經(jīng)過基因工程的細(xì)胞株。 細(xì)胞代謝和信號通路研究:在研究細(xì)胞代謝過程或信號通路時,使用透析胎牛血清可以排除無關(guān)小分子的影響,為研究細(xì)胞對特定物質(zhì)的反應(yīng)提供更精準(zhǔn)的環(huán)境。例如,在研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性時,科研人員利用透析胎牛血清為細(xì)胞創(chuàng)造一個無外源氨基酸干擾的環(huán)境,從而成功觀察到了病毒對宿主細(xì)胞的侵襲過程。 藥物篩選實驗:透析胎牛血清也能為細(xì)胞提供一個更加穩(wěn)定、無干擾的生長環(huán)境,從而提高藥物篩選的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。例如,有人要從化合物庫中篩選SIP4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導(dǎo)致的肺損傷,采用報告基因進行監(jiān)測,為了避免細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中存在的小分子的干擾,需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。類似在藥物研發(fā)過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細(xì)胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無外源小分子的培養(yǎng)體系,因而也要用透析胎牛血清。 細(xì)胞克隆篩選:雜交瘤細(xì)胞和CHO細(xì)胞等,在進行細(xì)胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。 綜上所述,透析胎牛血清在細(xì)胞實驗中具有廣泛的應(yīng)用價值,特別是在需要精確控制實驗條件的實驗中更是不可或缺。 |
|