胎牛血清透析之后可用于什么實驗?

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發表時間:2025-01-14 16:19

胎牛血清是從采自5~8月齡牛胚胎的血液中分離得到的血清,營養豐富,含有三四百種不同成分,這些成分對于細胞生長至關重要。胎牛血清常用于細胞培養,能夠為細胞提供必要的生長條件和支持細胞增殖。然而,在某些特定的細胞實驗中,普通胎牛血清可能無法滿足實驗需求,因此需要使用透析胎牛血清。透析胎牛血清是在普通胎牛血清的基礎上,通過透析處理去除分子量在1萬以下的小分子物質(如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素等)而得到的。這一處理過程使得透析胎牛血清在保留大分子營養成分的同時,降低了小分子物質的含量,從而減少了這些物質對細胞培養的干擾。透析胎牛血清因其特殊的處理工藝和性質,在多種細胞實驗中扮演著不可或缺的角色,具體可用于以下實驗:  

同位素標記實驗:同位素標記技術,例如Stable isotope labeling with amino acids in cell culture(SILAC),是一種基于質譜的蛋白質組學技術。它通過將13C或15N標記的氨基酸引入培養基,標記細胞內新合成的蛋白質,用于比較不同處理下的細胞蛋白質豐度。透析胎牛血清可用于排除天然氨基酸的干擾,以確保標記氨基酸的準確性。

工程細胞株的篩選:例如,CHO-DFGRˉ細胞株需要在培養基中添加次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸才能生存。透析胎牛血清可用作選擇培養基的一部分,以幫助篩選經過基因工程的細胞株。

細胞代謝和信號通路研究:在研究細胞代謝過程或信號通路時,使用透析胎牛血清可以排除無關小分子的影響,為研究細胞對特定物質的反應提供更精準的環境。例如,在研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性時,科研人員利用透析胎牛血清為細胞創造一個無外源氨基酸干擾的環境,從而成功觀察到了病毒對宿主細胞的侵襲過程。

藥物篩選實驗:透析胎牛血清也能為細胞提供一個更加穩定、無干擾的生長環境,從而提高藥物篩選的準確性和重復性。例如,有人要從化合物庫中篩選SIP4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷,采用報告基因進行監測,為了避免細胞培養環境中存在的小分子的干擾,需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養基來培養細胞。類似在藥物研發過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無外源小分子的培養體系,因而也要用透析胎牛血清。

細胞克隆篩選:雜交瘤細胞和CHO細胞等,在進行細胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。

綜上所述,透析胎牛血清在細胞實驗中具有廣泛的應用價值,特別是在需要精確控制實驗條件的實驗中更是不可或缺。



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