干貨分享:胎牛血清中的外泌體怎么去除胎牛血清中的外泌體怎么去除 二維碼
發表時間:2025-01-17 16:47 胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是細胞培養實驗中最常使用的試劑,為細胞生長提供豐富的營養物質。然而,在外泌體研究中,胎牛血清中大量的牛源外泌體會對實驗分析造成極大的干擾。因此,在進行外泌體研究時,需要去除胎牛血清中的外泌體。以下介紹幾種去除胎牛血清中外泌體的方法: 一、超速離心法 基于超高速離心機去除FBS中的外泌體。有些操作建議為120,000g,18小時,4℃。但需要注意的是,超速離心法的外泌體去除效果并不理想。有研究顯示,使用超速離心法處理的去外泌體血清(UC-dFBS)的外泌體去除率僅為88%,顆粒殘留量高出超濾處理方式和商品化去外泌體血清1~2倍。 二、超濾法 以超濾的方式去除FBS中的外泌體。例如,將常規FBS在Amicon ultra-15離心過濾器中以3,000g離心55分鐘。這種方法可以達到較高的外泌體去除率,有研究顯示,使用超濾處理方式的去外泌體血清(UF-dFBS)的外泌體去除率可以達到96%。 三、使用商品化去外泌體血清 目前市面上已有若干品牌的商品化去外泌體血清銷售,如SBI無外泌體胎牛血清等。這些血清通過先進的技術去除其中的外泌體成分,同時保留了傳統FBS中的營養成分和生長因子,為細胞培養提供了更加純凈的環境。使用方法和常規胎牛血清一致,無需做額外處理。 四、過濾法 使用特定的過濾裝置或技術去除胎牛血清中的外泌體。例如,有的去外泌體血清產品是由無菌采集的健康胎牛血清通過過濾法去除外泌體而成,去除率可達97%或98%以上。這種方法不僅有效去除了外泌體,還保留了FBS中重要的細胞營養因子,對細胞生長速率和形態無影響。 注意事項 在選擇去除方法時,需要考慮外泌體的去除效率以及對細胞生長的影響。 處理后的血清應進行嚴格的質量控制,確保無外泌體殘留且對細胞生長無負面影響。 儲存和處理過程中應注意無菌操作,避免污染。 綜上所述,去除胎牛血清中的外泌體有多種方法可選,包括超速離心法、超濾法、使用商品化去外泌體血清以及過濾法等。在實際應用中,應根據實驗需求和條件選擇合適的方法。 |
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