一線治療下不可切除轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤DNA的基因組時間異質(zhì)性

　　盡管 mCRC 的治療策略隨著分子診斷的改進而發(fā)展，但隨著時間的推移，患者體內(nèi)的分子異質(zhì)性會導(dǎo)致對一線和后期治療的抵抗。連續(xù) ctDNA 檢測可能有助于監(jiān)測治療效果，ctDNA可以追蹤RAS克隆以監(jiān)測耐藥性或接受抗 EGFR 再激發(fā)的潛力。但關(guān)于全身治療下 ctDNA 中 CRC 體細(xì)胞突變的演變及其臨床意義的研究仍然缺乏。

　　Feng Wang等人進行了一項前瞻性和觀察性研究，招募未接受全身治療的 mCRC 患者，并采用連續(xù) ctDNA 檢測來監(jiān)測一線治療期間體細(xì)胞變異的時間異質(zhì)性，并調(diào)查其與臨床結(jié)果的潛在相關(guān)性。

　　配對基線血漿和組織的突變一致性

　　在具有配對基線血漿和組織樣本的63名患者中分析表明，包含在 ctDNA NGS 板中的 378 個腫瘤相關(guān)基因中缺失或突變的流行率與基線腫瘤組織中觀察到的呈正相關(guān)（R 2 =0.91；p<0.001)。血漿和組織之間RAS/BRAFV600E狀態(tài)的總體一致性為 81.0% (51/63)，RAS和BRAFV600E狀態(tài)的不一致分別為17.5% (11/63) 和 1.5% (1/63)。此外，在僅有肝轉(zhuǎn)移的患者中，RAS 符合率為90.0%（18/20）。肝外病變患者的RAS符合率為79.1%（34/43）。這些數(shù)據(jù)顯示了腫瘤組織樣本和 ctDNA 樣本之間良好的基因水平一致性，但在 RAS 和 BRAFV600E突變中顯示出不一致。

　　63 名患者配對血漿和腫瘤組織樣本中基線突變的一致性分析。

　　一線治療下血漿ctDNA的基因組進化

　　在疾病進展 (PD) 前連續(xù)采集血漿樣本的 145 名患者隊列中，從基線 ctDNA 收集到 PD 前最后一次液體活檢樣本收集的中位時間為 4.67 個月（范圍：1.40-14.50 個月）。對基線和 PD 前最后一次液體活檢之間的**突變基因和 CRC 相關(guān)可操作變體的綜合比較顯示，經(jīng)過一段時間的治療后，大多數(shù)基因的突變頻率總體下降。對于標(biāo)準(zhǔn)護理 (SOC) 目標(biāo)，42.6% (26/61) 的 RAS 突變患者顯示 RAS 突變清除，其中 5 名 (5/61, 8.2%) 顯示 RAS 清除且可檢測到 ctDNA。50.0% (5/10) BRAF 突變患者顯示BRAF突變清除，而3.6% (3/84) 和0.7% (1/135) 患者顯示新的RAS 或BRAF 突變。

　　145 名患者一線治療下血漿循環(huán)腫瘤 DNA 的基因組時間異質(zhì)性。

　　根據(jù)血漿 RAS 和 BRAF V600E變化的臨床結(jié)果

　　結(jié)果表明ctDNA 水平與一線治療期間的腫瘤負(fù)荷呈正相關(guān)。此外，基線時 ctDNA 水平中位數(shù)為 14.0%（IQR，2.0%–47.4%），顯著高于 145 名患者在 PD 前最后一次活檢時的 0.5%（IQR，0%–4.0%）（p< 0.001），表明經(jīng)過一段時間的治療后 ctDNA 水平顯著下降。清除RAS或BRAF患者的中位無進展生存期明顯優(yōu)于保留RAS或BRAF突變患者的mPFS。清除RAS或BRAF的患者與保留RAS或BRAF野生型患者的中位總生存期(mOS)相似，而維持RAS或BRAF突變的患者mOS分別縮短為14.5個月(95% CI 12.7-NR；p=0.006)和11.4個月(95% CI 5.6到NR;p = 0.022)。

　　疾病進展后血漿ctDNA的基因組進化

　　對于 SOC 目標(biāo)，44.4%（4/9）的 RAS 突變患者顯示 RAS 清除，沒有患者顯示 BRAF 清除，而 27.3%（3/11）和 5.3%（1/19）的患者分別顯示新的 RAS或 BRAF 突變。所有 20 名患者的 ERBB2 在PD 后均保持野生型。此外，對于臨床試驗變異，只有 1 名患者獲得了新的 NF1 突變，而 95.0% (19/20) 的患者隨著時間的推移沒有表現(xiàn)出任何變化。同時，治療期間**反應(yīng)的 ctDNA 水平明顯低于基線和疾病進展。使用 ctDNA 檢測進行緩解評估時，ctDNA 水平在部分緩解或疾病穩(wěn)定的患者中下降，而在觀察到 PD 時增加。

　　20 例疾病進展后一線治療期間的基因組時間異質(zhì)性

　　總之，這項前瞻性、觀察性和大規(guī)模 ctDNA 分析研究為支持使用 ctDNA 測序捕獲 mCRC 的動態(tài)體細(xì)胞突變譜提供了進一步和確鑿的證據(jù)。并且，通過連續(xù) ctDNA 分析揭示了 mCRC 相關(guān)體細(xì)胞變異的時間異質(zhì)性，這在臨床實踐中應(yīng)得到特別關(guān)注，這一發(fā)現(xiàn)證明了 RAS 或 BRAF 基因的血漿體細(xì)胞突變狀態(tài)的變化伴隨通過生存結(jié)果的急劇變化。