實(shí)驗(yàn)室支原體污染檢測(cè)方法大PK，支原體PCR檢測(cè)試劑盒C位出道！

培養(yǎng)法：我叫支原體培養(yǎng)法，通過專用的培養(yǎng)基對(duì)待檢樣品中的支原體進(jìn)行分離鑒定，簡單來講，就是把細(xì)胞培養(yǎng)液或者細(xì)胞懸浮液接種到培養(yǎng)基，在一定條件下培養(yǎng)，觀察是否有支原體菌落出現(xiàn)，有點(diǎn)像荷包蛋，但也不是所有的支原體菌落都是荷包蛋樣的，也有圓形的。

培養(yǎng)法：我的靈敏度很高，而且是《中國藥典》認(rèn)同的方法。

培養(yǎng)法：是的，分離培養(yǎng)過程中長出明顯克隆需要7—29天，時(shí)間比較長，操作也比較復(fù)雜。

支原體DNA染色法：我叫支原體DNA染色法，通過把樣品接種到指示細(xì)胞中，就比如Vero細(xì)胞之類的，經(jīng)過培養(yǎng)之后，用特異性熒光染料（比如Hoechst染料）對(duì)支原體DNA進(jìn)行染色，順便說一句，我也是藥典推薦的方法。

支原體DNA染色法：跟1號(hào)選手相比，我普適性更強(qiáng)，適用于一些不易培養(yǎng)的支原體，操作也更簡單。

支原體DNA染色法：鑒定時(shí)間稍稍有些長，大概要4—14天，也有假陽性、假陰性的可能，需要在細(xì)胞污染比較嚴(yán)重的時(shí)候才能檢測(cè)出來。

支原體ELISA法：我可是這幾種方法里最考驗(yàn)操作者技術(shù)的一種。用支原體特異性抗體來檢測(cè)相應(yīng)的支原體。

支原體ELISA法：但是我的特異性很高，時(shí)間也比較短，3-5小時(shí)就可以出結(jié)果了。

締一生物：你們倆是必須一起合作，還是可以獨(dú)立工作呢？

常規(guī)PCR&qPCR：我們倆是一對(duì)兄弟，各自的業(yè)務(wù)能力都很強(qiáng)，無論是誰均可以獨(dú)立完成支原體檢測(cè)的工作。

締一生物：哦？那分別做一下自我介紹吧，哥哥常規(guī)PCR先來吧。

常規(guī)PCR：我會(huì)根據(jù)支原體核糖體16s—23s rRNA的特異保守序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)待檢樣本DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過分析對(duì)比擴(kuò)增產(chǎn)物的大小來做出診斷。

締一生物：那你跟其他幾位比有什么優(yōu)勢(shì)呢？

常規(guī)PCR：我的靈敏度高、特異性好；耗時(shí)短，2—3小時(shí)出結(jié)果；符合歐洲藥典；重點(diǎn)是操作簡便。

締一生物：那弟弟再來介紹一下自己吧。

qPCR：我前期的工作跟哥哥一樣，后續(xù)我可以將「針對(duì)支原體特異性保守序列探針」做熒光標(biāo)記，使擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光，利用熒光信號(hào)的變化和配套軟件進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)控。也就是說，我比哥哥多了一個(gè)相對(duì)量化的功能（就比如A樣品是B樣品的2倍這樣）。

締一生物：但我覺得你們倆都兩個(gè)缺點(diǎn)：不能判斷滅活處理后的樣品是否還有活的支原體，因?yàn)橹гwDNA一直都在也就是說，沒辦法判斷支原體滅活效果，而且你們鑒別支原體的能力，比較依賴試劑的質(zhì)量，不知道試劑的效果如何呢？

qPCR：其實(shí)我們可以聯(lián)合其他選手成團(tuán)合作，這樣準(zhǔn)確率更高；關(guān)于質(zhì)量方面也無需擔(dān)心，我們來自以嚴(yán)謹(jǐn)著稱的德國，是**生物試劑公司MB開發(fā)的專業(yè)支原體檢測(cè)試劑盒，支原體和軍團(tuán)菌技術(shù)和產(chǎn)品的開發(fā)在世界上遙遙領(lǐng)先。