100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品在檢測疫苗中支原體污染的應(yīng)用范圍

支原體核酸法是通過檢測支原體的特異核酸序列，以確定細(xì)胞上清或生物制品中是否存在支原體污染的一種方法。由于它具有檢測時(shí)間短（只需3-4h）、操作便捷等特點(diǎn)，越來越受到生物制品企業(yè)的青睞。

支原體核酸法包括PCR和qPCR，可作為藥典規(guī)定的培養(yǎng)法或DNA染色法的替代方法，或與以上方法相互補(bǔ)充。事實(shí)上，早在2011年，就有動物疫苗廠家在2011年第5期的《廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)》上，報(bào)道了用德國Minerva Biolabs（簡稱MB）公司的支原體PCR試劑盒，用于檢測疫苗中是否存在支原體的污染，它可與培養(yǎng)法互為補(bǔ)充，共同用于生產(chǎn)，為生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。

北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代理的德國Minerva Biolabs公司，支原體檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品——100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品，規(guī)格為3管/盒。       

1.100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)品信息（生產(chǎn)商：德國Minerva Biolabs公司）

注意：100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品使用前在2-8℃保存，性能穩(wěn)定。支原體復(fù)溶后要立即進(jìn)行DNA抽提，不要再保存，因?yàn)閾?dān)心可能降解。

2.100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品注意事項(xiàng)

（1）使用時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵循說明書操作流程。任何偏離可能會造成結(jié)果誤差。

（2）加入100CFU標(biāo)準(zhǔn)品的樣品不能超濾濃縮，否則會導(dǎo)致結(jié)果不可靠。

（3）100CFU/ml不能稀釋為10CFU/ml，因支原體存在集聚現(xiàn)象，在溶液中非均一狀態(tài)。

3.100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)品特點(diǎn)

（1）來自英國菌種保藏中心NCTC，是滅活支原體

（2）傳代次數(shù)少，支原體無變異

（3）產(chǎn)品為凍干粉，保證其穩(wěn)定性

（4）分析證書（COA）提供該批次GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數(shù)比值）

（5）支原體已滅活，保障細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室安全

4.100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品操作說明

標(biāo)準(zhǔn)品在復(fù)溶前，在室溫放置平衡。

（1）標(biāo)準(zhǔn)品短時(shí)離心，以收集凍干粉至管底。

（2）每管中加入1ml樣品基質(zhì)液（需保證無支原體污染）。

（3）室溫靜置5分鐘。

（4）渦旋混合10秒鐘，再離心5秒鐘。

（5）復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品即可用于DNA抽提。推薦使用MB的支原體DNA提取試劑盒 （英文名：VenorGeM Sample Preparation Kit）（每管核酸純化柱加200μl復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品）。