有哪些PCR實(shí)驗(yàn)的污染來源?如何檢測PCR?

?PCR實(shí)驗(yàn)的污染來源有哪些?

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發(fā)表時(shí)間:2023-04-14 13:16

PCR實(shí)驗(yàn)的污染來源有哪些?本期締一生物小編結(jié)合德國Minerva-Biolabs專業(yè)微生物控制污染跟大家分享PCR實(shí)驗(yàn)的污染來源和PCR實(shí)驗(yàn)室污染檢測。

樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢;不同樣本移液時(shí)忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時(shí)消毒滅菌;不同樣本同時(shí)開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散,相互交叉污染。

實(shí)驗(yàn)試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因?yàn)?/span>PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR/管處于0℃,但這個(gè)過程也充滿污染風(fēng)險(xiǎn)。

擴(kuò)增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋,這是PCR反應(yīng)中最主要、最常見的污染問題。因?yàn)?/span>PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。

那么對于【細(xì)胞和生物制品】及其生產(chǎn)過程中【支原體】污染的檢測,有什么PCR檢測方法嗎?

北京締一生物科技有限公司 國內(nèi)總代理的德國Minerva-Biolabs 品牌,常規(guī)PCR Kit(經(jīng)典法)(不含Taq酶)檢測試劑盒,英文:Venor Gem Classic,貨號:11-1025。

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常規(guī)PCR Kit(經(jīng)典法)(不含Taq酶)檢測試劑盒特點(diǎn)

1.內(nèi)控對照為獨(dú)立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性,僅一條陽性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細(xì)胞的支原體物種。操作簡單,易于觀察。

3.高靈敏度,若PCR反應(yīng)體系加入10μl樣本,支原體檢測限度為≤5≤10CFU

4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體,與細(xì)胞和真核DNA無交叉反應(yīng)。

5.試劑盒中不含Taq酶,可另外購買。推薦使用德國MB公司專用Taq酶。(貨號: 53-1050)

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