細胞培養的幾點注意事項？

對于很多老師和同學們來說養細胞是做好科研的**步，想要養好細胞，這些關鍵點必須注意，希望能夠幫助大家！

1.新買的或惠贈的細胞如何處理？

不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手應趕緊做這幾件事：檢測瓶子是否破裂；培養基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴增凍存。

2.能否使用與原先培養條件不同的培養基？

不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。

3.購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因？

常見原因可能有：培養基使用錯誤或培養基品質不佳；血清使用錯誤或血清的品質不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸浮細胞誤認為死細胞；培養溫度使用錯誤；培養箱氣體濃度達不到要求；細胞置于–80 ℃ 太久。

4.收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落的原因？

冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，是因熱脹冷縮的物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

5.冷凍管應如何解凍？

將冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，可佩戴防護眼鏡和手套預防冷凍管的爆裂。取出冷凍管后，須立即放入37 ℃ 水浴環境中快速解凍，輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內全部融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損害。并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。

6.細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除 DMSO？

現在大多數實驗室會在解凍細胞后加培養液將DMSO除去，但也有研究者認為除少數特別注明對 DMSO 敏感的細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，可直接放入含有 10~15 ml 新鮮培養基的培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除 DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。

在生物細胞學研究中，有時需要體外培養和分析癌細胞。細胞要養好，就要用好的胎牛血清。

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