提高PCR實驗準確靈敏,PCR性能穩定的關鍵點

想讓PCR實驗準確靈敏且穩定,這些關鍵點要關注

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發表時間:2023-05-12 15:40



想讓PCR實驗準確靈敏且穩定,這些關鍵點要關注


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PCR(其中包含qPCR)是一種常用的分子生物學技術,作為一類基礎的實驗,具有重要的應用價值。

除了常見的基因表達分析這類理論研究中,需要用到PCR技術,在臨床檢測、藥物生產過程監控等流程中,也會用到PCR技術。其中,用于細胞治療、疫苗生產等過程支原體檢測的,德國Minerva Biolabs支原體檢測試劑盒,也是基于qPCR的原理。

PCR實驗結果的準確性、靈敏性和穩定性,很大程度上會影響后續其他實驗。在生物藥項目申報等過程中,如果支原體檢測結果出現偏差,將有可能導致項目申報的失敗。因此,保證PCR實驗結果的準確性、靈敏性和穩定性十分重要。


清潔實驗環境

PCR實驗造成DNA大量合成,常常會給實驗室帶來核酸污染。由于核酸產物不能自動降解,因此DNA污染會不斷積聚。

由于PCR本身的特點,少量污染的DNA或RNA分子也會被檢測出來,從而造成實驗偏差。

傳統的紫外照射,僅對500bp以上長片段有效,對短片段效果不大,因此,該方法對祛除DNA污染并不理想。那么問題來了,該如何有效清除核酸污染?

使用德國Minerva Biolabs公司(簡稱MB)的PCR污染即用型祛除劑PCR Clean?。

PCR Clean?祛除DNA污染即用型試劑有噴霧和濕巾兩種樣式,在1分鐘之內即可有效地祛除核酸污染(對質粒、基因組和DNA、RNA擴增片段均有效),適合各種實驗臺、操作區域、設備和實驗耗材,高效迅速,使用方便。

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適當的實驗設計

一個設計良好的實驗,應有適當的對照和重復,可以幫助減少實驗變化,提高結果的準確性。

并且要對反應條件優化:包括退火溫度、Mg2+濃度、延長時間等反應條件,可以提高PCR擴增的特異性和效率。

因此,我們推薦使用商品化的試劑盒。以細胞質量等項目中,需要用到的支原體檢測試劑盒為例:德國MB支原體qPCR檢測試劑盒,Venor?Gem qEP

1、有獨立包裝的內控對照,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2、高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3、高靈敏度,最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4、相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

5、有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于最后定量檢測。


合適的樣品制備

合適的樣品制備,包括DNA提取和純化,可以幫助防止可能干擾PCR擴增的污染物或抑制劑的引入。

在檢測細胞中是否含有支原體時,除支原體檢測試劑盒Venor?Gem qEP以及標準品外,建議配套使用德國MB支原體DNA提取試劑盒,保證實驗的穩定性。


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北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian血清系列,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian特級澳洲進口胎牛血清,干細胞完全培養基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。了解更多產品信息請繼續瀏覽締一生物官網:www.276mk.com。


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