支原體檢測中qPCR技術重要嗎？支原體檢測中qPCR檢測技術重要嗎？ 二維碼
發表時間：2023-05-24 13:48 無論是歐洲藥典、日本藥典、還是中國藥典，均對細胞相關的臨床項目有明確的支原體檢測指標的要求。藥典中還指出，核酸法經過方法學驗證后，可替代傳統的培養法與指示細胞法進行檢測。 qPCR檢測支原體的技術原理—— Venor?GeM qEP 通過擴增高度保守的rRNA操縱子，或者更準確地說，擴增支原體基因組中的16S rRNA編碼區，可以特異性地檢測支原體。在FAM通道檢測支原體特異性擴增片段。在HEX通道檢測內部擴增對照的擴增。它能特異性檢測所有導致細胞污染的柔膜體物種。真核DNA不會被擴增。通過內部對照，可檢測PCR抑制劑的存在或不正確的DNA提取引起的假陰性結果。 樣本通常為細胞培養上清液，如檢測其他組織或細胞樣本，需要對樣本進行額外的處理，例如蛋白酶消化等過程。檢測程序通常可在3小時內完成。
1、快速簡便 與動輒30天起步的傳統培養法相比，qPCR技術的反應時間相對較短，通常在幾小時內就可以完成，大大縮短了用于檢測對的時間成本。 2、靈敏度高 qPCR技術可以在非常低的病原體濃度下進行檢測，這種高靈敏度使得qPCR能夠有效地檢測細胞培養體系、實驗或生產流程中，是否發生支原體污染，即使在污染的早期階段，也能夠得到準確的結果。 并且配合靈敏度標準品，進行靈敏度的驗證，進一步完善方法學驗證的流程。 以德國Minerva Biolabs公司的Venor Gem qEP為例，檢測限可達到≤10CFU/ml。 3、特異性強 qPCR技術可以使用特異性引物和探針來選擇性地擴增目標支原體的DNA序列。通過設計引物和探針與目標序列高度匹配，可以避免非特異性擴增產物的產生，從而提高檢測的特異性。 以德國Minerva Biolabs公司的Venor Gem qEP為例，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。 4、定量能力 與傳統的PCR技術相比，qPCR可以提供定量信息。通過利用熒光探針或DNA染料，可以實時監測PCR反應過程中的熒光信號強度，從而得到目標序列的定量結果。這種定量能力使得qPCR技術在支原體載量的測定和污染進程的監測中非常有用。 支原體檢測試劑盒
德國MB公司生產的支原體qPCR檢測試劑盒（均為探針法檢測），Venor Gem qEP，有以下優點： ①遵循歐洲藥典流程要求 ②高特異性。一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細胞均為陰性，無交叉反應）。
③高靈敏度。MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒經典法最低檢測限可達到≤10CFU/ml。 ④各類標準品配套齊全 10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品，便于方法學驗證。 支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。 支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。 北京締一生物科技有限公司國內總代德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。了解更多產品信息請繼續瀏覽締一生物官網：www.276mk.com。 |
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