支原體檢測試劑盒說明書——支原體qPCR檢測試劑盒說明書下載

支原體檢測對于工業和生物制藥和生物醫學來說來說都很重要。支原體檢測qPCR法是一種快速、敏感、特異性高的細胞支原體檢測方法。

德國MB支原體qPCR檢測試劑盒 貨號11-91025,通過《歐洲藥典》和《日本藥典》的方法學驗證，靈敏度高，特異性高，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。詳細德國MB支原體qPCR檢測試劑盒說明書下載可直接點擊。

德國MB支原體qPCR檢測試劑盒經典法用于細胞和生物制品及其生產過程中支原體污染的檢測。檢測迅速，2-3小時即可出結果?？梢耘浜现гwDNA提取試劑盒、支原體標準品一起使用。

德國MB Venor?GeM支原體檢測試劑盒（qPCR一步法）該試劑盒包括4管試劑，其中2管分別為緩沖液和PCR水，另2管為最主要試劑。1管即mix，含引物、核苷酸、聚合酶、熒光素標記的探針和內部擴增對照。另1管為陽性對照，均為凍干粉。

德國MB Venor?GeM支原體檢測試劑盒（qPCR一步法）它通過擴增高度保守的rRNA操縱子，或者更準確地說，擴增支原體基因組中的16S rRNA編碼區，可以特異性地檢測支原體。在520nm（FAMTM通道）檢測支原體特異性擴增片段。在610nm（HEXTM通道）檢測內部擴增對照的擴增。它能特異性檢測所有導致細胞污染的柔膜體物種。真核DNA不會被擴增。通過內部對照，可檢測PCR抑制劑的存在或不正確的DNA提取引起的假陰性結果。樣本為細胞培養上清液。檢測程序可在3小時內完成。

在檢測前，樣本需要一定的制備。具體是將100μl細胞培養上清液轉移至無菌的1.5 ml反應管中。關上蓋子扣緊。將樣品在95°C下孵育5分鐘。以**速度短暫離心樣品（15秒）以沉淀任何細胞碎片。然后可直接取2μl上清液進行qPCR。

qPCR反應體系一共是25ul，其中樣本2ul，其余是master mix。注意設置陽性對照、陰性對照（無模板對照）。

如果檢測的Ct<40，則表明PCR結果陽性。如果檢測的Ct≥40，則PCR反應結果為陰性。如果FAM陽性，則支原體陽性。如果FAM陰性，HEX也陰性，表明PCR擴增出了問題，需要重做。如果FAM陰性，HEX陽性，表明支原體確實陰性。

PCR擴增出了問題主要原因為PCR反應被抑制了，可能需要考慮做DNA抽提。

在qPCR反應中，引物和探針的設計尤為重要，它既需要覆蓋大多數支原體，又需要不與細菌和哺乳動物細胞DNA發生交叉反應。當然，Taq酶的性能也很重要，因為DNA的擴增最終依賴于酶的活性和擴增的速度。從這個角度說，一個好的qPCR試劑盒是各個因素共同作用的結果。

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