為什么支原體核酸檢測是陽性，培養法檢測是陰性？

支原體有多種類型，大部分支原體感染常見于呼吸道或泌尿生殖道，引起肺炎、尿道炎、女性宮頸炎和盆腔炎等。支原體是常見的寄生于人體的病原微生物，可在無生命培養基生長繁殖。但是無論何種支原體，當懷疑支原體感染進行檢測診斷時，常用的方法都有支原體DNA檢測或支原體培養。不過當兩種方法同時檢測，常常會出現一個情況，支原體核酸檢測是陽性，培養法檢測是陰性，是實驗室出錯了嗎？

其實這是因為方法學不同，病原體的檢出率也不同！

支原體DNA檢測

支原體DNA檢測是通過相關的檢測技術和儀器，提取出標本中的DNA物質，然后進行復制、擴增，后進行檢測。

不同的病原體甚至是不同的支原體，其遺傳物質DNA都是有其獨特片段的。利用這個特點，當擴增后的標本檢出支原體相應的DNA片段時，說明標本中存在支原體，即支原體陽性。

DNA物質在體外合適條件下，具有較穩定的特點。無論支原體在體外是否存活，其DNA物質在冷藏條件下，可以保持穩定約7天左右。

因此，只要取到足夠的支原體數量，無論標本中的支原體是否存活，支原體都可以被檢出。

支原體培養

支原體培養是將標本接種到適宜支原體生長的培養基中，標本中的支原體在適應的溫度、氧氣濃度等環境下，可以復制生長并形成菌落。

根據支原體形成的菌落的外觀特點，并根據支原體的生物特性進行生化檢測等，最終識別生長的病原體是否為支原體。

方法學限制，支原體培養成功需要的條件更多，比如：

1、標本到達實驗室時，支原體需存活。

2、存活的支原體數量需足夠多，特別是有菌環境標本如陰道分泌物存在菌群競爭的情況，只有足夠多的支原體存活，支原體才可以在競爭中復制生長。

由此可見，支原體DNA檢測比支原體培養有更高的檢出率。因此在日常使用中，出現支原體DNA陽性而培養陰性也屬于合理情況。

若無特殊，支原體感染的診斷更推薦使用支原體DNA檢測；支原體培養也可用于診斷支原體感染，但更推薦用于治療藥物的輔助選擇。

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支原體熒光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記，使PCR擴增后的產物帶有熒光，利用熒光信號的變化和配套軟件，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。

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1.內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3.高靈敏度，最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4.相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5.有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。

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