為什么支原體核酸檢測是陽性,培養(yǎng)法檢測是陰性?

支原體核酸檢測是陽性,培養(yǎng)法檢測是陰性是怎么回事?

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發(fā)表時間:2023-06-13 09:33

支原體有多種類型,大部分支原體感染常見于呼吸道或泌尿生殖道,引起肺炎、尿道炎、女性宮頸炎和盆腔炎等。支原體是常見的寄生于人體的病原微生物,可在無生命培養(yǎng)基生長繁殖。但是無論何種支原體,當(dāng)懷疑支原體感染進(jìn)行檢測診斷時,常用的方法都有支原體DNA檢測或支原體培養(yǎng)。不過當(dāng)兩種方法同時檢測,常常會出現(xiàn)一個情況,支原體核酸檢測是陽性,培養(yǎng)法檢測是陰性,是實(shí)驗室出錯了嗎?

其實(shí)這是因為方法學(xué)不同,病原體的檢出率也不同!


支原體DNA檢測

支原體DNA檢測是通過相關(guān)的檢測技術(shù)和儀器,提取出標(biāo)本中的DNA物質(zhì),然后進(jìn)行復(fù)制、擴(kuò)增,后進(jìn)行檢測。

不同的病原體甚至是不同的支原體,其遺傳物質(zhì)DNA都是有其獨(dú)特片段的。利用這個特點(diǎn),當(dāng)擴(kuò)增后的標(biāo)本檢出支原體相應(yīng)的DNA片段時,說明標(biāo)本中存在支原體,即支原體陽性。

DNA物質(zhì)在體外合適條件下,具有較穩(wěn)定的特點(diǎn)。無論支原體在體外是否存活,其DNA物質(zhì)在冷藏條件下,可以保持穩(wěn)定約7天左右。

因此,只要取到足夠的支原體數(shù)量,無論標(biāo)本中的支原體是否存活,支原體都可以被檢出。

支原體培養(yǎng)

支原體培養(yǎng)是將標(biāo)本接種到適宜支原體生長的培養(yǎng)基中,標(biāo)本中的支原體在適應(yīng)的溫度、氧氣濃度等環(huán)境下,可以復(fù)制生長并形成菌落。

根據(jù)支原體形成的菌落的外觀特點(diǎn),并根據(jù)支原體的生物特性進(jìn)行生化檢測等,最終識別生長的病原體是否為支原體。

方法學(xué)限制,支原體培養(yǎng)成功需要的條件更多,比如:

1、標(biāo)本到達(dá)實(shí)驗室時,支原體需存活。

2、存活的支原體數(shù)量需足夠多,特別是有菌環(huán)境標(biāo)本如陰道分泌物存在菌群競爭的情況,只有足夠多的支原體存活,支原體才可以在競爭中復(fù)制生長。

由此可見,支原體DNA檢測比支原體培養(yǎng)有更高的檢出率。因此在日常使用中,出現(xiàn)支原體DNA陽性而培養(yǎng)陰性也屬于合理情況。

若無特殊,支原體感染的診斷更推薦使用支原體DNA檢測;支原體培養(yǎng)也可用于診斷支原體感染,但更推薦用于治療藥物的輔助選擇。

北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代理的德國Minerva-Biolabs 支原體檢測系列產(chǎn)品,支原體檢測qPCR法,qPCR Kit(經(jīng)典法)Venor Gem qEP。

qPCR Kit  (經(jīng)典法).jpg

支原體熒光定量PCR法(qPCR:是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標(biāo)記,使PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時監(jiān)測,簡稱qPCR

支原體qPCR檢測試劑盒Venor Gem qEP優(yōu)點(diǎn):

靈敏度高、特異性強(qiáng)。

時間短,2-3小時出結(jié)果

檢測結(jié)果可定量

操作簡便

支原體qPCR檢測試劑盒Venor Gem qEP特點(diǎn):

1.內(nèi)控對照為獨(dú)立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細(xì)胞的支原體物種(包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體)。與細(xì)菌和真核DNA無交叉反應(yīng)。

3.高靈敏度,最低檢測限可達(dá)到≤10CFU/ml

4.相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA,便于特異性驗證。

5.有相應(yīng)配套的支原體絕對定量標(biāo)準(zhǔn)品,便于最后定量檢測。

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