細(xì)胞支原體污染了，如何快速去除支原體污染？

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如果已確認(rèn)細(xì)胞支原體污染了，直接的方法就是終止試驗(yàn)，丟棄被支原體污染的細(xì)胞和耗材，重新開始培養(yǎng)細(xì)胞。那對于好不容易培養(yǎng)的細(xì)胞，不舍得丟棄，如何快速去除支原體污染呢？今天小編根據(jù)德國MB支原體祛除產(chǎn)品跟大家分享兩款快速清除細(xì)胞支原體污染試劑。

珍貴生物樣品去除支原體試劑

對于珍貴的，樣品不可再得的細(xì)胞，或價格昂貴的種子細(xì)胞，不但無法丟棄，而且作為種子細(xì)胞，還需要徹底根除支原體污染。此時，需選用特異性的支原體殺除劑，德國Minerva-Biolabs Mynox?。貨號:10-0200。此試劑可在2-3小時內(nèi)將支原體主動殺除。特別適合細(xì)胞保種。

Mynox?為枯草桿菌中提取出的生物制劑，加入培養(yǎng)液中，可特異性地與支原體膜結(jié)合，改變膜通透性。通過此生物物理的方法，2～3小時內(nèi)，即可把細(xì)胞中的支原體殺除掉。因?yàn)榧?xì)胞膜結(jié)構(gòu)與支原體膜不同，故Mynox?不會與細(xì)胞膜結(jié)合，因此無細(xì)胞毒性。

注意：3小時后，需將此試劑洗脫，將細(xì)胞更換到新的培養(yǎng)耗材和培養(yǎng)液中，重新培養(yǎng)。

此時，不應(yīng)使用PCR方法檢測細(xì)胞中支原體。由于支原體解體，故PCR結(jié)果為假性強(qiáng)陽性。

Mynox?殺除支原體功能強(qiáng)大有效，但價格較貴。

細(xì)胞支原體去除劑

那有沒有相對價格合適又有效的支原體去除劑呢？德國Minerva-Biolabs 細(xì)胞支原體去除劑ZellShield?，貨號13-0050。可以滿足此需求

實(shí)驗(yàn)人員可選用對支原體特效的抑制劑，通過對細(xì)胞的前期處理，中期加藥，逐步通過4代左右的培養(yǎng)，得以將支原體污染徹底清除，確保試驗(yàn)順利推進(jìn)，結(jié)果準(zhǔn)確。

ZellShield原理是：通過抑制支原體增殖中DNA和蛋白的合成，達(dá)到抑制新的支原體增殖的目的。屬復(fù)合型的新型抗生素。

注：使用ZellShield?時，不需使用鏈青霉素。

操作步驟：

**步：研究發(fā)現(xiàn)，98%的支原體污染發(fā)生在細(xì)胞間隙。因此，首先要把細(xì)胞消化下來，放入離心管，懸浮沖洗，離心，棄上清，反復(fù)三次。此時可將細(xì)胞上大部分的支原體去除，為進(jìn)一步加藥抑制做好準(zhǔn)備。

第二步：培養(yǎng)液中加入1%的ZellShield?，細(xì)胞進(jìn)行正常培養(yǎng)。新的支原體增殖受到抑制，舊的支原體隨著細(xì)胞的換液逐步減少，通過4代左右的培養(yǎng)，細(xì)胞中的支原體基本可被徹底清除。

有些細(xì)胞保種中心，當(dāng)珍貴細(xì)胞被支原體污染后，會將Mynox?和ZellShield?結(jié)合使用，效果確切，結(jié)果令人滿意。以上兩種支原體去除劑都對細(xì)胞支原體污染清除很有效，支原體在實(shí)驗(yàn)室中，非常常見的微生物污染了，所以實(shí)驗(yàn)室環(huán)境一定要定期清潔，使用德國MB實(shí)驗(yàn)環(huán)境用的支原體祛除噴霧劑，即用型支原體去除劑，只需要將常用的耗材工作臺噴一噴，就可減少支原體污染的概率，節(jié)省細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的時間。了解更多產(chǎn)品信息請繼續(xù)瀏覽締一生物官網(wǎng)：www.276mk.com。?