細(xì)胞培養(yǎng)實戰(zhàn)指南之污染控制

1、設(shè)備的清潔與滅菌

在開始任何細(xì)胞培養(yǎng)實驗之前，必須對所有設(shè)備、耗材和試劑進(jìn)行滅菌處理，當(dāng)然，我們推薦實驗人員盡量選擇商品化的無菌試劑。

滅菌方法包括高壓滅菌、過濾、紫外線照射、乙醇噴灑或擦拭、消毒清潔試劑噴灑或擦拭等。

2、環(huán)境的清潔與滅菌

所有細(xì)胞培養(yǎng)工作應(yīng)在無菌和清潔的環(huán)境中進(jìn)行。因此要對實驗環(huán)境進(jìn)行清潔與滅菌。

包括實驗前對實驗空間定期清潔，包括桌面、地面、墻面、生物安全柜操作臺等，開始實驗前，還應(yīng)打開生物安全柜中的紫外線燈進(jìn)行照射滅菌。

除了常規(guī)的消毒試劑，這里推薦使用德國Minerva Biolabs的Mycoplasma-off支原體祛除噴霧劑，不僅對支原體起作用，還能高效清除并預(yù)防細(xì)菌、真菌等污染物。水浴鍋、培養(yǎng)箱水槽等環(huán)境，可以添加Water Shield?，有效預(yù)防水源中的支原體、細(xì)菌、真菌、霉菌、孢子的污染。

3、正確處理實驗材料

正確處理實驗材料，實驗操作應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定、避免交叉污染。包括佩戴適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)設(shè)備，如手套、口罩；及時更換移液器一次性器具等操作。

4、實驗室合理布局

在實驗過程中，嚴(yán)格遵守實驗室中物品擺放準(zhǔn)則，以培養(yǎng)箱舉例：培養(yǎng)皿擺放密度應(yīng)合理，宜少不宜多等。

5、定期監(jiān)測培養(yǎng)物

定期監(jiān)測培養(yǎng)物，對于及早發(fā)現(xiàn)和解決而言，也是一個關(guān)鍵點(diǎn)。這包括在顯微鏡下檢查培養(yǎng)物狀態(tài)、肉眼觀察培養(yǎng)基的形態(tài)、顏色等變化等。必要時可以使用PCR技術(shù)定期測試微生物污染的存在。