LAMP技術(shù)與qPCR技術(shù)的區(qū)別

支原體檢測(cè)技術(shù)之LAMP技術(shù)與qPCR技術(shù)的區(qū)別

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發(fā)表時(shí)間:2023-08-14 14:59

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(Loop-Mediated Isothermal AmplificationLAMP)是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于在等溫條件下快速擴(kuò)增DNARNA分子。LAMP適用于迅速、特異性高的核酸檢測(cè),常用于病原體檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等。與傳統(tǒng)的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)相比,LAMP技術(shù)不需要復(fù)雜的溫度循環(huán),只需要恒定的溫度即可實(shí)現(xiàn)核酸的高效擴(kuò)增。今天跟大家分享的是lamp法和qpcr法的區(qū)別

LAMP技術(shù)與qPCR技術(shù)的區(qū)別

擴(kuò)增原理:

LAMP:等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),且引物設(shè)計(jì)與擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)都很復(fù)雜。

qPCR:在不同溫度下進(jìn)行的循環(huán)性核酸擴(kuò)增技術(shù),通過(guò)熒光信號(hào)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的積累,實(shí)現(xiàn)定量分析。

溫度條件:

LAMP:一個(gè)恒定的等溫環(huán)境(通常在60-65°C),對(duì)設(shè)備要求較低。

qPCRqPCR需要多個(gè)溫度循環(huán),包括變性、退火和延伸階段,需要精確的溫控設(shè)備。

qPCR Kit  (經(jīng)典法).jpg

引物設(shè)計(jì):

LAMP:使用多個(gè)引物,包括外部引物、內(nèi)部引物和環(huán)引物。這些引物的設(shè)計(jì)相對(duì)復(fù)雜,要求特定的序列和結(jié)構(gòu)。

qPCR:使用少量的引物(通常一對(duì)引物),引物設(shè)計(jì)相對(duì)簡(jiǎn)單,需要特異性和合適的引物序列。

實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè):

LAMP:產(chǎn)物通常通過(guò)肉眼可見的方式來(lái)判斷,也可以使用熒光染料等進(jìn)行增強(qiáng)。

qPCR:利用熒光探針或SYBR Green等熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的積累,可以定量分析。

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