常規(guī)PCR檢測技術及原理

常規(guī)PCR檢測技術及原理

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發(fā)表時間:2023-08-21 14:23

PCRPolymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應,是指在DNA聚合酶催化下,以母鏈DNA為模板,以特定引物為延伸起點,體系中加入dNTPMg2+以及延伸因子、擴增增強因子,通過變性、退火、延伸等步驟,體外復制出與母鏈模板DNA互補的子鏈DNA的過程,能快速特異地在體外擴增任何目的DNA

常規(guī)PCR的擴增開始時間并不是放進PCR儀,運轉程序才開始擴增。當體系配置完成的時候,擴增就開始了,這可能會引起非特異性擴增出現(xiàn),熱啟動PCR可以解決這一問題。什么是熱啟動PCR?當反應體系配制好后,在反應初始加熱階段或熱啟動階段,酶修飾物在高溫下(通常高于90 ℃)被釋放,使得DNA聚合酶被激活。具體激活時間和溫度取決于DNA聚合酶以及熱啟動修飾物的性質。該方法主要利用抗體、親合配體、或化學修飾物等修飾物,來抑制的DNA聚合酶的活性。由于DNA聚合酶在常溫下的活性被抑制,熱啟動技術為在常溫下配制多個PCR反應體系提供了極大的便利,且無需犧牲PCR反應的特異性。

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常規(guī)PCR Kit( 預分裝法)(含PCR管,聚合酶,lodding buffer)   VenorGeM Advance

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常規(guī)PCR檢測試劑盒特點

1.內(nèi)控對照已加在預混液中,無需另外配制,使用便捷。

2.高特異性,僅一條陽性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡單,易于觀察。

3.高靈敏度,1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。

4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體。

5.各類試劑預先包被分裝在PCR管中,無需將預混液再進行分裝,節(jié)約時間,減少污染。

6.凝膠上樣緩沖液和染料已預混在反應緩沖液中。PCR反應結束后,產(chǎn)物可直接上樣到瓊脂糖凝膠上。簡化操作步驟,節(jié)約時間。

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