支原體檢測 測的是什么？上清 or 細胞？

在細胞治療、疫苗生產等領域，藥物在上市前，需要通過支原體檢測，證明生產過程中沒有支原體的污染。一般情況下，支原體附著在細胞表面，因此，在檢測前，收集細胞后，保留上清，用于后續檢測實驗。

德國MB公司生產的Venor?GeM qEP試劑盒設計用于定量檢測細胞培養物和其他生物基質中的支原體，該試劑盒是基于實時或定量PCR (qPCR)，作為快速，穩健和敏感支原體的，可替代《藥典》種傳統方法的檢測手段。

該檢測針對支原體基因組中的一個高度保守區域，以檢測歐洲藥典第2.6.7章(EP 2.6.7)、日本藥典第G3章(JP G3)和更多物種(見“檢測特征”一節中的列表)中包含的所有物種。

該產品已通過廣泛的qPCR設備成功測試。試劑盒設計滿足EP 2.6.7和JP G3對不同樣品材料(軟骨細胞、血清、細胞培養上清等)提取樣品DNA后的檢測標準。

實驗開始時，需要先收集細胞培養上清，如果細胞含量較低，可對培養物進行富集。用支原體提取試劑盒，對其中的DNA進行提取。

整個測試需要不到3小時，并且與基于發光的酶測定、熒光染色或培養方法相比，不需要活的支原體細胞。值得注意的是，與幾種生化和細胞方法相比，PCR檢測被認為在靈敏度和精度方面優越。該試劑盒包含所有必要的PCR成分，包括熱啟動Taq聚合酶，引物和dNTPs在凍干混合物(支原體混合物)以及補液緩沖液和PCR級水。

德國MB還可提供10CFU/100CFU的配套標準品，以及各類支原體基因組DNA，幫助相關項目完成藥典的方法學驗證。

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