貼壁細(xì)胞如何去除支原體污染

貼壁細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)支原體污染的時(shí)候，清除支原體污染的方法如下：

貼壁細(xì)胞的處理方法

1、制備細(xì)胞和『治療液』

在無菌的6厘米培養(yǎng)皿中加入2.8 ml含5% (v/v) FCS的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)基。加入200μl Mynox?(1瓶)。

加入2ml新鮮胰蛋白酶化的10^4 - 10^5個(gè)細(xì)胞。

包括細(xì)胞在內(nèi)的處理混合物的總體積為5ml。

2、Mynox?的處理和去除

在正常生長條件下，將細(xì)胞與『治療液』混合物保持一整個(gè)傳代過程(約6至8天)。然后除去含有Mynox?的培養(yǎng)基，將細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基中傳代。8天為上限，若細(xì)胞未長滿皿底，終止處理，丟棄含有Mynox?的培養(yǎng)基，并添加新鮮的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)基。

Mynox?是一種無抗生素的生物試劑，可以整合到支原體膜中，損害其完整性。它的活性基于生物物理機(jī)制，因此不會產(chǎn)生耐藥菌株。其結(jié)果是滲透性內(nèi)流導(dǎo)致支原體膜完全解體。被根除支原體，細(xì)胞可以立即恢復(fù)其原有的形態(tài)和正常增殖速度。迄今為止，Mynox?尚未顯示會導(dǎo)致正常細(xì)胞特性的任何變化。

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