實驗室細胞污染之細菌污染

細胞污染是生物實驗室中常見的問題之一，輕則引起細胞狀態改變，降低實驗結果的可重復性，重則會直接導致細胞的死亡，影響實驗進度，本篇文章就跟大家分享細胞污染之細菌污染。

細菌是一種原核細胞微生物，一般為微米級別。細胞培養過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌、假單胞菌等。

細胞發生細菌污染后，有哪些癥狀？與其他污染相比，細菌污染在細胞培養過程中“發病”更為迅速，較容易被發現。具體表現為：

細胞培養基短期內變黃且渾濁（大量酸性物質累積）；

靜置的培養液時不渾濁，但稍加震蕩，就有許多渾濁物漂起；

可見培養液中有大量圓球狀顆粒物漂浮；

細胞停止生長并有中毒表現，后出現大量死亡；

如何用實驗來驗證，細胞是否被細菌污染？常見的染色法、培養法以及PCR方法都可以對細菌污染進行檢測。

如果只需要初步判定細胞是否被污染，課選擇涂片染色或培養法對樣品進行檢測。

例如：革蘭氏染色法會使陽性菌呈現紫色，陰性菌呈現紅色；向肉湯培養基內滴入少量培養液，37 ℃培養，培養基變渾濁；專業的PCR檢測：以Minerva Biolabs公司的細菌PCR檢測試劑盒（Onar? Bacteria Detection Kit，貨號：12-1025）為例：

該試劑盒采用PCR方法，用于檢測生物樣品（包括細胞培養物和病毒貯存液）中是否存在細菌。根據序列分析，該試劑盒可檢測超過45種細菌屬，其中含污染細胞的常見菌屬：

如果細胞不幸遭遇到了細菌污染的侵襲，該如何應對呢？對于常規細胞培養物而言，發生細菌污染，建議直接將培養物丟棄，并對環境進行消殺，紫外線滅菌、消毒液擦拭培養箱、工作臺等。

對于重要且污染相對較輕的細胞：一般用抗生素的常用量的 5~10 倍作沖擊療法，用藥 24~48 小時后再換常規培養液，但需要需要注意的是：一旦發生污染后再使用抗生素常常難以根除，有的抗生素只有抑菌作用而無殺菌效應。且有研究表明，大量使用抗生素，或對細胞基因組產生影響。

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