什么時候細胞傳代比較好？貼壁細胞如何進行傳代?

細胞培養(yǎng)是生物學(xué)基礎(chǔ)實驗中的基礎(chǔ)，養(yǎng)不好細胞，后續(xù)的實驗都難以開展。而細胞培養(yǎng)中也時常會有各種狀況發(fā)生，今天跟大家分享的是細胞傳代的兩個問題，也是很多同學(xué)關(guān)心的兩個問題，分別是細胞何時進行傳代和貼壁細胞該如何進行傳代。

細胞何時進行傳代較好?

一般情況下細胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細胞，在匯合前就必須進行傳代，這類細胞一般在密度70-80%就進行傳代，否則會引起細胞分化。

貼壁細胞如何進行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4 ml PBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000 rpm/min室溫離心5min;棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6 ml，37C、5%CO2箱培養(yǎng)。