細胞培養中常出現一些黑點，如何解決細胞支原體污染?

細胞培養中常出現一些黑點，是細胞污染了嗎?

出現這種情況，先肉眼觀察培養液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養液沒有變渾濁: 在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規則，是否運動，是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規則，做布朗運動，黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態不佳或者消化過度引起的)，也可能是血清反復凍融產生的蛋白沉淀引起的，也可能是細胞的代謝產物。如果黑點大小一致快速移動，很可能是細菌污染。21黑點已經產生了，如何進行處理?

如果判定黑點是污染，請及時將細胞處理后丟棄。其他情況，可參照以下進行:

如果是懸浮細胞: 收集細胞上清慢速離心(500-600rpm/min，5-6 min)并更換新的培養瓶:如果是貼壁細胞:將細胞用PBS洗2-3遍，洗的時候，輕輕拍打培養瓶，讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落，再棄去PBS，消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，讓細胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來，去掉低濃度胰酶，然后正常消化細胞，將收集的細胞懸液慢速離心(500-600rpm/min，5-6 min)并更換新的培養瓶，并可以嘗試適當增加血清濃度進行培養。

如果發現是支原體污染細胞，實驗者可選用對支原體特效的抑制劑，通過對細胞的前期處理，中期加藥，逐步通過4代左右的培養，從而將支原體污染徹底清除，確保試驗順利推進，結果準確。

Zell Shield?支原體祛除劑是一種即用型新型復合抗生素，副作用極低，能有效地祛除細胞培養支原體、細菌、真菌污染。Zell Shield?使用方法簡單，直接加入培養基中保護細胞。

Zell Shield?原理是通過抑制支原體增殖中某種蛋白的合成，達到抑制新的支原體增殖的目的。屬復合型的新型抗生素。它廣泛適用于細胞培養相關的科研和工業領域。