qPCR技術中DNA和RNA的差異與應用

RNA和DNA在qPCR技術中的差異與應用

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發表時間:2023-11-09 15:04

定量PCRqPCR)是一種在DNARNA水平上對特定基因或整個基因組進行定量分析的強大技術。它通過使用特定的引物和熒光染料或探針,在PCR反應中跟蹤DNARNA的擴增過程,從而實現對起始模板的定量。

對于DNAqPCR利用DNA聚合酶將DNA鏈從引物起始處逐一復制。在每個循環中,熒光染料可以標記新合成的DNA鏈,從而可以通過監測染料的熒光信號來跟蹤DNA的擴增。

對于RNA,通常先通過逆轉錄(RT)將RNA轉化為cDNA,然后進行qPCR。在這個過程中,使用逆轉錄酶和特定引物將RNA逆轉錄為cDNA。然后,qPCR就像對DNA一樣對cDNA進行定量。

qPCRDNARNA應用

基因表達分析:通過比較不同組織或細胞中特定基因的RNA水平,可以研究這些基因在不同條件下的表達情況。例如,可以研究藥物處理后特定基因的表達變化,或者比較健康和疾病狀態下特定基因的表達差異。

病毒檢測:qPCR可以用于檢測和定量病毒DNARNA,用于診斷病毒感染和研究病毒復制機制。

基因組測序:qPCR可以用于基因組測序,以確定特定基因或基因區域的拷貝數變異。

癌癥研究:qPCR可以用于分析癌癥組織中特定基因的突變或擴增,以研究癌癥的起源和進展。

藥物發現:qPCR可以用于分析藥物處理后特定基因的表達變化,幫助發現新的藥物治療目標。

qPCR是一種強大且高度靈活的技術,可以應用于許多科學領域,包括生物學、醫學和藥學等。

qPCR Kit  (經典法).jpg

德國MB公司生產的支原體qPCR檢測試劑盒(均為探針法檢測),依據操作步驟的細微差別, 分『經典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產品,具有以下獨特的優點:

①經典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性,一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體),根據序列一致性,至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽性,其他微生物或真核細胞均為陰性,無交叉反應)。

③高靈敏度,MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒經典法最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒一步法最低檢測限≥50個基因組/反應。

④MB公司有相應配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品,便于方法學驗證。

MB公司有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

MB公司有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于最后定量檢測。


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