復蘇凍存的細胞要注意的關鍵點

復蘇凍存的細胞的關鍵點

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發表時間:2023-11-10 15:39

上篇文章我們提到凍存細胞的方法,那復蘇細胞需要注意什么呢?小編結合網上搜索較高的三個問題,跟大家分享復蘇凍存細胞的關鍵點。

冷凍管應如何解凍?
將冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,可佩戴防護眼鏡和手套預防冷凍管的爆裂。取出冷凍管后,須立即放入37℃水浴環境中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損害。并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。

收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落的原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,是因熱脹冷縮的物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO

現在大多數實驗室會在解凍細胞后加培養液將DMSO除去,但也有研究者認為除少數特別注明對DMSO敏感的細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,可直接放入含有10~15ml新鮮培養基的培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。

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