如何檢測細胞是否有支原體污染？

細胞培養(yǎng)中有高達80%的概率被支原體污染，其中大部分是由于操作者的不規(guī)范沒有佩戴口罩，造成的口腔支原體污染。所以支原體檢測是很有必要的，如果是用作方法驗證，可采用支原體靈敏度標準品來檢測支原體。

支原體污染初期, 在高倍顯微鏡下（400倍），雖然細胞無明顯變化，但是在細胞膜周圍或細胞間隙可以發(fā)現(xiàn)細小黑色顆粒。細胞培養(yǎng)時間延長, 盡管培養(yǎng)液不渾濁（一般細菌污染培養(yǎng)液會變渾濁）, 但培養(yǎng)液pH值變化明顯然后顏色變黃（雖然一般的細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基也會變黃，但是速度要慢很多）。

在支原體感染較重的時候可以引起細胞變形。
如果你們實驗室沒有常規(guī)殺除支原體的操作，那么我相信只要你們在用細胞培養(yǎng)標本去送RNA-seq、LncRNA測序、CirRNA測序時，公司給出的結果都會有支原體污染。

PCR擴增法

這種方法是目前最常用的方法，可以用瓊脂糖凝膠電泳檢測和熒光定量檢測，檢測原理都是在支原體16S rRNA基因的保守區(qū)設計引物，通過檢測支原體基因組的方法來檢測細胞中有無支原體的污染。如果有支原體的存在，則在瓊脂糖凝膠電泳或者熒光定量擴增時，就可以檢測到。

北京締一生物科技有限公司 國內(nèi)總代理的德國MB 產(chǎn)品

100CFU支原體靈敏度標準品

支原體靈敏度標準品（方法驗證用）

歐洲藥典和日本藥典要求，如果用PCR法替代培養(yǎng)法檢測支原體時，此PCR檢測的靈敏度需達到10CFU/ml。如替代DNA染色法，其靈敏度需達到100CFU/ml

德國MB公司提供系列的支原體靈敏度標準品（滅活支原體），用于核酸擴增法（qPCR/PCR法）檢測支原體的方法學驗證。

產(chǎn)品特點

（1）來自英國菌種保藏中心NCTC，是滅活支原體；

（2）傳代次數(shù)少，支原體無變異；

（3）產(chǎn)品為凍干粉，保證其穩(wěn)定性；

（4）分析證書（COA）提供該批次GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數(shù)比值）；

（5）支原體已滅活，保障細胞實驗室安全。

北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養(yǎng)實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清，干細胞培養(yǎng)基,馬血清，德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問締一生物官網(wǎng)：www.276mk.com。聯(lián)系電話:4006661688。