如何檢測細胞是否有支原體污染?

檢測細胞是否有支原體污染

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發表時間:2023-11-16 16:33

細胞培養中有高達80%的概率被支原體污染,其中大部分是由于操作者的不規范沒有佩戴口罩,造成的口腔支原體污染。所以支原體檢測是很有必要的,如果是用作方法驗證,可采用支原體靈敏度標準品來檢測支原體。

支原體污染初期, 在高倍顯微鏡下(400倍),雖然細胞無明顯變化,但是在細胞膜周圍或細胞間隙可以發現細小黑色顆粒。細胞培養時間延長, 盡管培養液不渾濁(一般細菌污染培養液會變渾濁), 但培養液pH值變化明顯然后顏色變黃(雖然一般的細胞培養培養基也會變黃,但是速度要慢很多)。

在支原體感染較重的時候可以引起細胞變形。
如果你們實驗室沒有常規殺除支原體的操作,那么我相信只要你們在用細胞培養標本去送RNA-seqLncRNA測序、CirRNA測序時,公司給出的結果都會有支原體污染。

PCR擴增法

這種方法是目前最常用的方法,可以用瓊脂糖凝膠電泳檢測和熒光定量檢測,檢測原理都是在支原體16S rRNA基因的保守區設計引物,通過檢測支原體基因組的方法來檢測細胞中有無支原體的污染。如果有支原體的存在,則在瓊脂糖凝膠電泳或者熒光定量擴增時,就可以檢測到。

北京締一生物科技有限公司 國內總代理的德國MB 產品

100CFU支原體靈敏度標準品

10CFU支原體檢測限標準品.jpg

支原體靈敏度標準品(方法驗證用)

歐洲藥典和日本藥典要求,如果用PCR法替代培養法檢測支原體時,此PCR檢測的靈敏度需達到10CFU/ml。如替代DNA染色法,其靈敏度需達到100CFU/ml

德國MB公司提供系列的支原體靈敏度標準品(滅活支原體),用于核酸擴增法(qPCR/PCR法)檢測支原體的方法學驗證。

產品特點

1)來自英國菌種保藏中心NCTC,是滅活支原體;

2)傳代次數少,支原體無變異;

3)產品為凍干粉,保證其穩定性;

4)分析證書(COA)提供該批次GUCFU比值(支原體基因組/菌落數比值);

5)支原體已滅活,保障細胞實驗室安全。

北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清,干細胞培養基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網:www.276mk.com。聯系電話:4006661688。

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