PCR檢測之Taq聚合酶作用

   PCR檢測之Taq聚合酶作用

大多數體外擴增應用使用耐熱酶進行聚合酶鏈反應(PCR)。最常用的 PCR 酶是 Taq DNA 聚合酶。那Taq 聚合酶應用哪些方面呢？

基因分型

通過PCR 進行基因分型，使用設計用于特異性擴增突變的引物確定生物體的基因型（例如 WT 或突變體）。

使用修飾核苷酸進行PCR

底物包括dNTP、ddNTP、dUTP、肌苷、生物素-11-dUTP、DIG-11-dUTP 和熒光-dNTP/ddNTP。

單菌落PCR

通過裂解細菌，然后使用插入片段特異性或載體特異性引物進行擴增，利用PCR 快速篩選 DNA 插入片段。

使用3'-A 單鏈突出端進行 TA 克隆

Taq 將單個 A 添加到 dsDNA 的 3’ 端，然后將 PCR 產物與具有互補 3′-T 單鏈突出端的載體混合。