qPCR凍干粉試劑——支原體qPCR支原體檢測的實力派

隨著細胞治療等生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展，各國法規(guī)和相關(guān)機構(gòu)，也逐步加強了，對生物制品安全性和可靠性的監(jiān)管。其中支原體檢測，是一個關(guān)鍵項目。

在各國藥典中均指出，可以使用經(jīng)過方法學(xué)驗證的核酸法，可替代培養(yǎng)法和指示細胞法，對相關(guān)生物產(chǎn)品進行支原體檢測。因此，在進行支原體檢測實驗時，應(yīng)選擇通過方法學(xué)驗證的qPCR試劑盒，兼顧靈敏度和特異性，實現(xiàn)高效且精準的檢測。

如何實現(xiàn)檢測的高效與精準生物試劑，尤其是具有活性或功能的試劑，對于產(chǎn)品的劑型、儲存方法、運輸溫度都有比較高的要求。

劑型決定了產(chǎn)品本身是否穩(wěn)定穩(wěn)定，而穩(wěn)定性又進一步?jīng)Q定了產(chǎn)品儲存和運輸甚至是使用方法的難易程度。

穩(wěn)定性越好的產(chǎn)品，對于儲存、運輸過程的溫度要求相對更簡單，操作難度小，產(chǎn)品則更易保留更大的活性，更容易實現(xiàn)高效且精準的qPCR檢測結(jié)果。

不同劑型的比較用于方法驗證的支原體檢測試劑盒以qPCR法為主。目前，市場上大多數(shù)支原體檢測類的qPCR試劑盒，其試劑多以液體劑型為主。

實際生產(chǎn)、運輸、使用過程中，液體試劑很容易發(fā)生失活的情況：

凍干粉試劑的特點

為了克服液體試劑的缺點，盡可能保留生物試劑的活性不因溫度的改變而被破壞，德國MB公司的qPCR檢測試劑盒，采用了新型的凍干粉劑型。

穩(wěn)定性強：凍干粉試劑在制備過程中經(jīng)過冷凍和真空干燥處理，去除了水分，活性物質(zhì)處于“休眠狀態(tài)”，進而有助于提高試劑的穩(wěn)定性。

運輸條件相對簡單：因此相比于液體試劑，凍干粉試劑更適合長期存儲和運輸，對溫度的要求也寬松，4℃（冷鏈溫度：2-8℃）即可，減少了對冷凍設(shè)備的依賴，操作運輸簡便且容錯率高，減少了失活的可能性。

降低污染可能性，適合長期儲存和長時間運輸，結(jié)果更可靠：由于水分被去除，也減少了其中微生物生長繁殖的可能性，降低了試劑被微生物污染的風(fēng)險。因此，與液體試劑相比，凍干粉試劑更適合長期保存與運輸，進一步提高結(jié)果的可靠性。

降低氧化反應(yīng)：水溶液的存在，容易促使一些氧化反應(yīng)的發(fā)生，從而導(dǎo)致試劑失活。凍干粉中的低水分含量有助于防止這些氧化反應(yīng)的發(fā)生，維持試劑的活性。

德國Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測系列試劑盒，如：Venor?Gem qEP，貨號：11-9025、11-9100、11-9250，試劑采用凍干粉形式，使用時復(fù)溶即可，盡可能保持試劑的活性，為支原體檢測提供更穩(wěn)定準確的結(jié)果，完成高靈敏度、強特異性的方法驗證。

德國MB支原體檢測試劑盒（Venor?Gem qEP）特點：

①遵循歐洲藥典流程要求。

②高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細胞均為陰性，無交叉反應(yīng)）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒檢測限可低至≤10CFU/ml。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品，便于方法學(xué)驗證。

⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體定量標準品，便于最后定量檢測。