動物細胞培養之胰蛋白酶與膠原蛋白酶作用一樣嗎？

動物細胞培養之胰蛋白酶與膠原蛋白酶作用一樣嗎？

要使細胞相互分離，可以用酶將細胞間粘連著的蛋白質(如膠原蛋白、層粘連蛋白、纖粘連蛋白、彈性蛋白等)消化了。

教材采用的酶是胰蛋白酶或膠原蛋白酶，這里的“或”不是任意選擇的意思，因為這2種酶的作用對象并不一樣。

胰蛋白酶是一種胰臟制品，能強烈地消化細胞間質較少的軟組織如肝、腎、甲狀腺﹑羊膜、胚胎組織等，而對含結締組織較豐富的如乳腺、滑膜、子宮、纖維肉瘤﹑腫瘤組織等則無效，而且如果消化時間過長，還會損害細胞的呼吸酶和細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，因此，消化后要馬上對培養細胞進行洗滌。

膠原蛋白酶則是一種從細菌中提取出來的酶，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織，它對細胞間質中的膠原成分有較好的消化作用，雖然作用緩慢但因對細胞本身影響不大，故還是能達到分散細胞的目的。

動物細胞為什么會貼壁生長？

以鱗翅目昆蟲斜紋夜蛾(Spodoptera litura)為例，其血細胞在體內是分散的，但是如果將這些血細胞分離出來進行原代培養，就會發現這些原本分散的細胞出現了貼壁生長的現象"。

為什么同樣的細胞在體內是分散的而在體外卻出現貼壁生長的現象呢?想一想,如果體內生活的血細胞是彼此連接,那么勢必會堵塞血管，但如果將這些細胞轉移到培養瓶中制成細胞懸液，則由于細胞的密度稍大于培養液的密度，而會在重力作用下造成這些細胞沉積到培養瓶的底部。

同時,由于細胞生活的內環境發生改變，遂使細胞會向外表達產生一些黏連分子,如基膜黏連蛋白和Ⅰ型、IV型膠原蛋白等。這些黏連蛋白一方面與細胞外基質相連,另一方面與培養瓶(招)發生黏連作用,結果導致體外培養的細胞發生貼璧生長的現象",可見,導致細胞貼璧最主要的原因是基因選擇性表達所產生的相應的黏連蛋白。