熒光定量PCR和逆轉錄qPCR有何區別？

熒光定量PCR（qPCR）在PCR反應進行的同時，實時監測和記錄DNA或RNA的擴增過程，而無需在反應結束后進行分析。這一特性使得實時PCR能夠提供更準確、靈敏和快速的定量分析。

熒光探針： 實時PCR使用熒光標記的DNA探針，通常有兩種類型：SYBR Green和探針探測法。SYBR Green與所有雙鏈DNA結合并發光，而探針探測法使用特定探針與目標序列結合發光。

PCR反應： 在PCR反應中，熒光信號與擴增的DNA量成正比。隨著PCR的進行，熒光信號實時被監測。

實時監測： PCR儀器能夠在每個PCR循環中實時測量熒光信號的強度，記錄在PCR反應過程中DNA量的變化。

定量分析：通過與已知濃度的標準曲線比較，可以確定初始模板的數量，從而實現對目標序列的定量分析。

qPCR用于精確、定量測量目標DNA或RNA的數量，通常用于基因表達分析、病原體定量檢測、突變分析等。qPCR是一個定量的技術，可以提供精確的分析結果。

病原體檢測和量化：

• 在臨床診斷中用于檢測和定量病毒、細菌等病原體的核酸，如檢測流感病毒等。

• 用于監測感染性疾病的病程和治療效果。

突變分析：

• 用于檢測DNA序列中的點突變、插入和缺失，有助于遺傳病變的分析。

• 在癌癥研究中用于檢測腫瘤相關基因的突變。

轉基因檢測和定量：

• 用于檢測和定量轉基因植物或動物中的外源基因。

• 在食品安全領域用于檢測食品中是否存在轉基因成分。

微生物學研究：

• 用于定量測量環境樣本中的微生物數量，研究微生物在環境中的分布和變化。

藥物研發和評估：

• 用于研究藥物對基因表達的影響，評估藥物在細胞水平上的效果。

• 用于篩選潛在藥物靶點和藥物治療的效果。

• 新藥上市前支原體檢測

環境監測：

• 用于監測環境中的污染物，如檢測空氣、水和土壤中的微生物和病原體。

• 在環境生物學研究中應用于生態系統的研究。

生物標記物的定量分析：

• 用于定量測量生物標記物的數量，如檢測血液中的特定蛋白質或核酸。

逆轉錄qPCR real-time RT-PCR

real-time RT-PCR的中文名稱是實時逆轉錄聚合酶鏈反應，是一種結合了逆轉錄（RT）和實時聚合酶鏈式反應（qPCR）的技術，用于從RNA樣本中合成相應的cDNA，并在逆轉錄的同時實時監測和定量擴增特定的RNA序列。