qPCR 和 Real-time PCR有何區別?

Real-time PCR

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發表時間:2024-01-04 16:14

核酸檢測中PCR技術分裂成很多種技術,PCR技術除了常規PCR,還包含RT-PCR、qPCR、Real-time PCR、real-time RT-PCR等其他類別,今天分享的是qPCR和Real-time PCR有何區別?都可應用在哪些方面。



Real-time PCR


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Real-time PCR的中文名字是實時聚合酶鏈式反應,也被稱作實時熒光定量PCR,簡稱qPCR。

需要注意的是,"Real-time PCR"與"qPCR"(Quantitative PCR),通常是指同一種技術。而RT-PCR雖然與Real-time PCR的簡寫相同,但試劑上是兩種不同的技術。


Real-time PCR技術原理


Real-time PCR(qPCR)在PCR反應進行的同時,實時監測和記錄DNA或RNA的擴增過程,而無需在反應結束后進行分析。這一特性使得實時PCR能夠提供更準確、靈敏和快速的定量分析。

熒光探針: 實時PCR使用熒光標記的DNA探針,通常有兩種類型:SYBR Green和探針探測法。SYBR Green與所有雙鏈DNA結合并發光,而探針探測法使用特定探針與目標序列結合發光。

PCR反應: 在PCR反應中,熒光信號與擴增的DNA量成正比。隨著PCR的進行,熒光信號實時被監測。

實時監測: PCR儀器能夠在每個PCR循環中實時測量熒光信號的強度,記錄在PCR反應過程中DNA量的變化。

定量分析:通過與已知濃度的標準曲線比較,可以確定初始模板的數量,從而實現對目標序列的定量分析。


Real-time PCR應用


qPCR用于精確、定量測量目標DNA或RNA的數量,通常用于基因表達分析、病原體定量檢測、突變分析等。qPCR是一個定量的技術,可以提供精確的分析結果。


病原體檢測和量化:

  • 在臨床診斷中用于檢測和定量病毒、細菌等病原體的核酸,如檢測流感病毒等。

  • 用于監測感染性疾病的病程和治療效果。

突變分析:

  • 用于檢測DNA序列中的點突變、插入和缺失,有助于遺傳病變的分析。

  • 在癌癥研究中用于檢測腫瘤相關基因的突變。

轉基因檢測和定量:

  • 用于檢測和定量轉基因植物或動物中的外源基因。

  • 在食品安全領域用于檢測食品中是否存在轉基因成分。

微生物學研究:

  • 用于定量測量環境樣本中的微生物數量,研究微生物在環境中的分布和變化。

藥物研發和評估:

  • 用于研究藥物對基因表達的影響,評估藥物在細胞水平上的效果。

  • 用于篩選潛在藥物靶點和藥物治療的效果。

  • 新藥上市前支原體檢測

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環境監測:

  • 用于監測環境中的污染物,如檢測空氣、水和土壤中的微生物和病原體。

  • 在環境生物學研究中應用于生態系統的研究。

生物標記物的定量分析:

  • 用于定量測量生物標記物的數量,如檢測血液中的特定蛋白質或核酸。

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