德國(guó)MB支原體標(biāo)準(zhǔn)品凍干粉常見問題和解答

德國(guó)MB廠家具有ISO 9001和ISO 13485體系認(rèn)證。每個(gè)批次支原體標(biāo)準(zhǔn)品都有驗(yàn)證和質(zhì)控。同時(shí)支原體培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基每個(gè)批次都依據(jù)EDQM（European Directorate for the Quality of Medicines）標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)過驗(yàn)證和質(zhì)控。標(biāo)準(zhǔn)品每一批的質(zhì)控證書（COA）可從廠家網(wǎng)站上下載。支原體菌株來自英國(guó)NCTC菌種保藏中心，也有相應(yīng)的ATCC編號(hào)。

10CFU標(biāo)準(zhǔn)品，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中用量，即驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)時(shí)需多少有效數(shù)據(jù)？

答：10CFU標(biāo)準(zhǔn)品，使用時(shí)需要用1ml你的樣本基質(zhì)（如培養(yǎng)基）溶解，然后需要提取支原體DNA，以保證最高靈敏度（推薦MB公司的支原體DNA提取試劑盒）。每個(gè)DNA純化柱需要樣本量是200ul，產(chǎn)出是50ul。每個(gè)qPCR反應(yīng)需要加DNA樣本量是10ul。MB廠家推薦1個(gè)樣本是8個(gè)復(fù)孔。一般靈敏度與耐用性（Robust）是在一起驗(yàn)證的，也就是說，要前后做3輪獨(dú)立試驗(yàn)，每次每個(gè)樣本建議是8個(gè)復(fù)孔，這樣計(jì)算下來，2管10CFU標(biāo)準(zhǔn)品是夠用了，這也正是10CFU標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)在的包裝。說明：為保證結(jié)果可靠性，還需要同時(shí)做陰性對(duì)照。

如何驗(yàn)證滅活菌和活菌是一樣的？

因活支原體會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室污染（這對(duì)用戶來說是不可接受的），所以標(biāo)準(zhǔn)品采用的是滅活支原體。滅活支原體也是通過活支原體培養(yǎng)后再定量和滅活而來，它和活支原體的檢測(cè)是一樣的。最終檢測(cè)結(jié)果說明一切。

問：溶解標(biāo)準(zhǔn)品后，抽提是否全抽完，還是也可以保存

廠家建議10CFU標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶了以后，要立即抽提，不要再保存，因?yàn)閾?dān)心可能降解。

問：您好，我這邊要提取10cfu對(duì)照品的基因組，10cfu對(duì)照品的說明書寫著用1ml基質(zhì)重懸，基因提取試劑盒說一次上樣200μl進(jìn)行提取，想問您一下，用200μl基質(zhì)重懸10cfu可以嗎，想一次提完。

答：還是建議用1ml的基質(zhì)重懸，因?yàn)殪`敏度是以10CFU/ml為單位的。如果用200ul，濃度就高了。廠家建議10CFU標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶了以后，要立即用完，不要再保存，擔(dān)心可能降解。

問：那1ml溶解的標(biāo)準(zhǔn)品，按提取試劑盒的要求，就得用多個(gè)管子一次提完對(duì)吧？

答：是的。

問：支原體10cfu標(biāo)準(zhǔn)品是干粉吧？ 配完后是多少體積？

答：是凍干粉，加基質(zhì)液后是1ML體積。

問：基質(zhì)液產(chǎn)品里帶嗎？

答：這個(gè)產(chǎn)品里不帶，是客戶自己要檢測(cè)哪類樣品，就用樣品里的基質(zhì)液（例如用的哪個(gè)培養(yǎng)基）

問：標(biāo)準(zhǔn)品用1ml溶解，就是用培養(yǎng)基？

是用樣本基質(zhì)，要看客戶樣本是什么。如果是細(xì)胞上清，那就是用細(xì)胞培養(yǎng)基。要注意，溶解標(biāo)準(zhǔn)品的細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)沒有支原體污染。標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)帶陰性對(duì)照，陰性對(duì)照也是用培養(yǎng)基溶。