支原體PCR檢測95度加熱目的

支原體PCR檢測是一種用于檢測支原體DNA的方法。在PCR檢測過程中，95度加熱的目的是使DNA雙鏈解旋，即變性，從而使引物能夠結(jié)合到單鏈DNA上，進(jìn)行后續(xù)的擴(kuò)增反應(yīng)。

PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種體外DNA擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)，其基本原理是酶促DNA合成反應(yīng)。在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經(jīng)DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴(kuò)增延伸。這一過程需要在特定的溫度條件下進(jìn)行，其中包括高溫變性、低溫退火和適中的溫度延伸三個(gè)步驟。其中，高溫變性一般需要將溫度升高到95度左右，以使DNA雙鏈充分解旋，為后續(xù)的引物結(jié)合和DNA擴(kuò)增提供條件。

德國Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的Venor?GeM經(jīng)典試劑盒，為檢測細(xì)胞培養(yǎng)物和其他生物基質(zhì)中支原體而設(shè)計(jì)。基于傳統(tǒng)PCR方法，可實(shí)現(xiàn)快速、穩(wěn)健、高靈敏度的支原體污染檢測。

產(chǎn)品名稱：支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒

英文：Venor? Gem Classic

品牌：Minerva-Biolabs?

貨號(hào)：11-1025

規(guī)格：25次/盒

產(chǎn)品特點(diǎn)及原理

該試劑盒針對(duì)支原體基因組中的一個(gè)高度保守區(qū)域：16s rRNA編碼區(qū)，以檢測歐洲藥典第2.6.7章(EP 2.6.7)、日本藥典第G3章(JP G3)和更多物種中包含的所有物種，根據(jù)支原體種類的不同，擴(kuò)增子的大小在265-278 bp之間。

試劑盒設(shè)計(jì)滿足EP 2.6.7和JP G3不同樣品材料(如細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞培養(yǎng)基、Tris緩沖液)的檢測標(biāo)準(zhǔn)。該檢測方法適用于通常用于研究的細(xì)胞培養(yǎng)上清、“細(xì)胞培養(yǎng)富集”方法或DNA提取后的支原體直接檢測。該試劑盒符合EP 2.6.7和JP G3的要求。

整個(gè)測試僅需要3小時(shí)左右的時(shí)間，并且與基于發(fā)光的酶測定、熒光染色或培養(yǎng)方法相比，不需要活的支原體細(xì)胞。