細(xì)胞被口腔支原體污染,如何去除如何去除細(xì)胞口腔支原體污染 二維碼
發(fā)表時(shí)間:2024-02-07 12:03 細(xì)胞被口腔支原體污染后,去除支原體污染的方法包括以下幾種: 丟棄被污染的細(xì)胞和耗材,重新復(fù)蘇細(xì)胞,選用未被污染的細(xì)胞株、血清和培養(yǎng)基,并規(guī)范操作。 對(duì)于珍貴的、樣品不可再得的細(xì)胞,或價(jià)格昂貴的種子細(xì)胞,可以選用特異性的支原體殺除劑,如Mynox?,清除污染,保護(hù)細(xì)胞。該試劑可在2-3小時(shí)內(nèi)將支原體主動(dòng)殺除,特別適合細(xì)胞保種。 使用支原體特異性血清,如5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng),故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性,并且5個(gè)月后仍為陰性。 請(qǐng)注意,清除細(xì)胞中的支原體污染需要謹(jǐn)慎操作,并選擇合適的方法,以確保細(xì)胞的健康和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。如果污染較嚴(yán)重或無(wú)法有效清除,建議丟棄污染的細(xì)胞并重新開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。同時(shí),預(yù)防支原體污染同樣重要,包括使用優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基、血清和細(xì)胞株,以及規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作等。 Mynox細(xì)胞支原體祛除劑適用范圍 被支原體污染的珍貴細(xì)胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液(特別是不能長(zhǎng)期培養(yǎng)的樣品)。 (1)對(duì)于貼壁細(xì)胞: 步驟1. 培養(yǎng)皿中加入200μl Mynox?和 2.8ml培養(yǎng)基中(FBS≤5%),混勻。 步驟2. 再加入2ml細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為104~105,培養(yǎng)基中的FBS需≤5%)。 步驟3. 細(xì)胞培養(yǎng)2小時(shí),棄上清,換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。 (2)對(duì)于懸浮細(xì)胞: 步驟1. 在離心管中加入200μl Mynox?和1.6ml胰酶(0.125 %,5 mM EDTA in PBS),混勻。 步驟2. 加入1.6ml細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為104~105)。 步驟3. 室溫靜置30min。 步驟4. 600×g離心5min。棄上清,換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。10-02002管/盒 |
|